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谈述胰腺炎磷酸化STAT3在急性胰腺炎并发肺损伤中表达实验设计

最后更新时间:2024-01-30 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:36066 浏览:161285
论文导读:(6只);组2急性胰腺炎并发肺损伤组(APALI6只):组3雷帕霉素处理组(6只),于诱导急性胰腺炎并发肺损伤末次注射雨蛙素前1h注射。末次注射后1h立即解剖胰腺及肺组织,胰头、右下肺病理检查及免疫组化,胰腺体尾部及余肺组织行westernblots测定磷酸化STAT3蛋白表达水平。结果:Balb/C12h、20h实验组及昆明白20h实验组造模成功:胰腺腺泡
摘要:目的:探讨磷酸化STAT3在急性胰腺炎并发肺损伤后表达的作用,为临床及基础进展作出一定的贡献。策略:将昆明白、ICR、Balb/C3中不同品系小鼠各12只腹腔内注射雨蛙素诱导并建立急性胰腺炎并发肺损伤模型,雨蛙素(50μg/kg)稀释于生理盐水中,每小时注射1次,连续腹腔注射12h、20h;对照组腹腔注射等量生理盐水(0.2m1)。各组末次注射后1h下腔静脉取血测血淀粉酶,取胰腺、肺脏组织行病理学检查。观察不同品系小鼠注射雨蛙素12h、20h后胰腺、肺组织形态学及血淀粉酶水平差别,选择适合本实验的模型小鼠;根据前面的实验结果,采取合适的模型小鼠作为动物材料,12只雄性健康小鼠实验组、对照组各6只,末次注射后1h立即解剖小鼠,胰头、右下肺病理检查及免疫组化,胰腺体尾部及余肺组织行westernblots测定磷酸化STAT3蛋白表达水平;最后通过阻断STAT3磷酸化观察组织损伤程度的变化,18只雄性小鼠,随机分为组1对照组(6只);组2急性胰腺炎并发肺损伤组(APALI6只):组3雷帕霉素处理组(6只),于诱导急性胰腺炎并发肺损伤末次注射雨蛙素前1h注射。末次注射后1h立即解剖胰腺及肺组织,胰头、右下肺病理检查及免疫组化,胰腺体尾部及余肺组织行westernblots测定磷酸化STAT3蛋白表达水平。结果:Balb/C12h、20h实验组及昆明白20h实验组造模成功:胰腺腺泡广泛变性、坏死及空泡化:炎症细胞大量浸润。肺部间质及部分肺泡腔有炎细胞浸润、肺不张、肺泡间隔增宽。昆明白12h实验组及ICR20h实验组仅出现胰腺轻微损伤,未见肺组织变化。造模成功组中Balb/C12h、20h实验组比较差别无统计学作用(P0.05);Balb/C12h实验组与昆明白20h实验组病理学评分比较差别无统计学作用(p>0.05)。各品系内12h、20h实验组与相应对照组血淀粉酶比较差别有统计学作用(P0.05)。Balb/C小鼠对药物反应灵敏,用药量少,节约时间与成本,更适用于急性重症胰腺炎模型的探讨。免疫组化:对照组可见磷酸化STAT3呈极微弱阳性表达,少数分布于肺泡、支气管上皮细胞、胰腺实质。实验组可见肺、胰腺组织磷酸化STAT3强阳性表达,遍布肺泡上皮、支气管上皮、胰腺实质细胞及浸润的炎症细胞,胰腺组织中胰岛细胞核染显著。Westernblots:与对照组相比,实验组可见胰腺、肺组织中出现显著的磷酸化STAT3表达的信号,光密度扫描结果显示,实验组胰腺的磷酸化STAT3表达强度是对照组2.23倍(p0.05)肺组织磷酸化STAT3表达强度分别是对照组2.21倍(p0.05)。雷帕霉素处理后急性胰腺炎的损失程度减轻,免疫组化提示对照组可见磷酸化STAT3呈极微弱阳性表达,少数分布于肺泡、支气管上皮细胞、胰腺实质;实验组可见肺、胰腺组织磷酸化STAT3强阳性表达,遍布肺泡上皮、支气管上皮、胰腺实质细胞及浸润的炎症细胞,胰腺组织中胰岛细胞核染显著。处理组可见肺、胰腺组织磷酸化STAT3表达量较实验组减少。Westernblots:与对照组相比,实验组可见胰腺、肺组织中出现显著的磷酸化STAT3表达的信号,光密度扫描结果显示,实验组胰腺的磷酸化STAT3表达强度是对照组2.23倍(p0.05),处理组胰腺的磷酸化STAT3表达强度是对照组1.51倍(p0.05)实验组肺组织磷酸化STAT3表达强度分别是对照组2.21倍(p0.05),处理组肺组织磷酸化STAT3表达强度分别是对照组1.52倍(p0.05)。结论:在急性胰腺炎并发肺损伤中磷酸化STAT3蛋白被激活,炎症晚期通过减少磷酸化STAT3表达,可起到保护性作用。关键词:雷帕霉素论文急性胰腺炎论文肺损伤论文STAT3论文小鼠论文
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Abstract6-10
缩略语/符号说明10-11
前言11-13
探讨近况、成果11
探讨目的、策略11-13

一、不同品系小鼠急性胰腺炎并发肺损伤模型的比较13-21

1.1 对象和策略13-16

1.1 探讨对象13

1.2 试剂和仪器设备13

1论文导读:1.2.2组织病理学转变16-191.3讨论19-201.4小结20-21二、磷酸化STAT3在急性胰腺炎并发肺损伤中的表达21-292.1对象和策略21-232.1.1探讨对象212.1.2试剂和仪器设备21-222.1.3实验策略222.1.4统计学策略22-232.2结果23-262.2.1胰腺组织及肺组织病理学转变232.2.2胰腺及肺组织免疫组化23-242.2.3胰腺及肺组织磷酸化
.

1.3 实验策略13-15

1.4 统计学策略15-16

1.2 结果16-19

1.2.1 血淀粉酶测定结果16

1.2.2 组织病理学转变16-19

1.3 讨论19-20

1.4 小结20-21

二、磷酸化STAT3在急性胰腺炎并发肺损伤中的表达21-29

2.1 对象和策略21-23
2.

1.1 探讨对象21

2.

1.2 试剂和仪器设备21-22

2.

1.3 实验策略22

2.

1.4 统计学策略22-23

2.2 结果23-26

2.1 胰腺组织及肺组织病理学转变23

2.2 胰腺及肺组织免疫组化23-24

2.3 胰腺及肺组织磷酸化STAT3蛋白Western Blot浅析24-26

2.3 讨论26-28

2.4 小结28-29

三、磷酸化STAT3在急性胰腺炎并发肺损伤中表达的作用29-45

3.1 对象和策略29-37

3.

1.1 探讨对象29

3.

1.2 试剂和仪器设备29-30

3.

1.3 实验策略30-36

3.

1.4 统计学策略36-37

3.2 结果37-41
3.

2.1 胰腺组织及肺组织病理学转变37-38

3.

2.2 胰腺及肺组织免疫组化38-39

3.

2.3 胰腺及肺组织磷酸化STAT3蛋白Western Blot浅析39-41

3.3 讨论41-44

3.4 小结44-45

结论45-47
参考文献47-50
发表论文和参加科研情况说明50-51
综述51-59
参考文献56-59
致谢59