简论纯化皂角刺总黄酮抗肿瘤有效组分筛选及活性评价集

论文导读：柱色谱梯度洗脱等分离纯化策略,再以CCK-8法测定皂角刺总黄酮不同分离纯化产物对体外四种肿瘤细胞增殖作用的影响,筛选出对肿瘤增殖抑制率较高的组分,之后对此组分再进行进一步的分离纯化,旨在为后期课题皂角刺总黄酮的进一步分离纯化及制备有效单体的探讨提供科学的实验依据。策略：以不同极性的有机溶剂回流提取中药皂角刺总
摘要：目的：前期各项实验研表明,皂角刺总黄酮(Flonoids from Spina Gleditsiae,FSG)对多种肿瘤细胞的增殖都具有显著的抑制作用。本探讨通过对皂角刺总黄酮乙醇浸膏以不同溶剂回流提取,硅胶柱色谱梯度洗脱等分离纯化策略,再以CCK-8法测定皂角刺总黄酮不同分离纯化产物对体外四种肿瘤细胞增殖作用的影响,筛选出对肿瘤增殖抑制率较高的组分,之后对此组分再进行进一步的分离纯化,旨在为后期课题皂角刺总黄酮的进一步分离纯化及制备有效单体的探讨提供科学的实验依据。策略：以不同极性的有机溶剂回流提取中药皂角刺总黄酮中的不同成分,得到五种不同提取部位的成分样品。体外培养HepG2人肝癌细胞株,Bel-7402人肝癌细胞株,K562人白血病细胞株,HCT116人结肠癌细胞株于含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,置于37℃、饱和湿度的5%CO2培养箱中。取对数生长期的细胞,调整合适的细胞悬液密度,分别接种于96孔培养板,用不同浓度(12.5、25.50.100.200)μg·mL-1的不同药品成分及纯化后分别处理24h,48小时后,以CCK-8法测定皂角刺总黄酮不同分离部位产物对体外四种肿瘤细胞增殖作用的影响,筛选出对肿瘤增殖抑制率较高的组分,再以此组分上硅胶柱进一步分离纯化,以有机溶剂梯度洗脱,再次得到不同的分离纯化样品,再以CCK-8法测定这些不同洗脱成分体对体外四种肿瘤细胞增殖作用的影响,进一步筛选对肿瘤细胞增殖抑制率较高的成分。用统计学策略处理和浅析数据。结果：回流提取中按照极性由小到大的顺序依次分别为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇、纯净水,五种溶剂对皂角刺总黄酮进行回流提取得到五个产物,其中以正丁醇和95%乙醇提取物在(12.5、25、50、100、200)μg·mLL-1浓度下对HepG2、Bel-7402、K562、HCT116的等肿瘤细胞的抑制率具有较好的量效联系,尤其在(100、200)μg·mL-1非常显著。正丁醇和95%乙醇对四种癌细胞的最高抑制率分别为(62.00±6.12)、(65.00±7.45)；(43.00±9.34)、(76±13.22)、(94.00±3.74)、(93.00±5.38)、(92.00±6.32)、(95.00±12.11)。选取正丁醇和95%乙醇回流产物为下一步硅胶柱色谱纯化的样品,得到五个不论文导读：5、展望55-56参考文献56-59上一页12
同的洗脱成分,将这五个成分再次用CCK-8法测定其对体外四种肿瘤细胞增殖作用的影响,筛选出对肿瘤增殖抑制率较高的那个组分,再进行进一步的分离纯化。筛选出的组分对各肿瘤细胞增殖的抑制作用随着浓度的增加而增强,呈现出较好的量效联系,P0.05,具有统计学作用。结论：采取加热回流提取—硅胶柱层析纯化的工艺路线对皂角刺总黄酮进行分离纯化,纯化后的某些成分抗肿瘤活性显著,并且呈现出一定的量效联系,说明皂角刺中某个单一成分或某些单一成分有着较显著的抗肿瘤活性,并且这些单一成分是可以提取分离出来的,这对皂角刺总黄酮抗肿瘤活性成分的进一步分离纯化、筛选以及皂角刺中抗肿瘤活性单体的提取制备探讨有重要作用。关键词：皂角刺总黄酮论文分离纯化论文CCK-8法论文抗肿瘤活性筛选论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要3-5
Abstract5-9
前言9-14
材料与策略14-25

1.主要实验材料与仪器14-16

2 实验策略16-25
结果25-38
讨论38-44

1.阜角刺总黄酮的分离纯化38-40

2 皇角刺总黄酮各组分抗肿瘤活性评价40-42

4.不足和展望42-44

结论44-45
参考文献45-48
英汉缩略词对照表48-49
致谢49-50
中药中黄酮类化合物的提取分离纯化探讨进展50-59

1、黄酮类化合物的结构50

2、黄酮类化合物的功能50-51

3、黄酮类化合物的提取策略51-54

4、黄酮类化合物的分离纯化策略54-55

5、展望55-56

参考文献56-59