试议芽孢一株解淀粉芽孢杆菌溶藻作用及对其它微生物影响

论文导读：
摘要：随着我国水体富营养化现象的日趋严重及有毒藻类水华的频繁暴发，探讨行之有效的抑制藻类水华暴发的途径及其迫切。利用溶藻菌除藻已成为制约水华蓝藻的一种可能途径。本课题通过对实验室分离保存的溶藻芽孢杆菌T1菌株进行l6SrDNA测定浅析及形态、生理生化试验，将T1菌株初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamylopquefaciens）。实验结果表明，T1菌株所产生的溶藻活性物质是一种主要有着于无菌滤液中的热稳定性的非蛋白类小分子物质。在一定藻细胞数范围内，抑藻效果随着T1无菌滤液浓度的增加而显著加强。向初始藻浓度为2.5×10~6个/mL的微囊藻905A藻液中，按1%添加量接入初浓度为108个/mL的T1菌液，第五天时，T1菌液的抑藻率可达98.9%，比相同接种量条件下的枯草芽孢R2和解淀粉芽孢杆菌ACCC10225分别高29.4%和35.2%。向初始藻浓度为1.5×10~6个/mL的微囊藻905A藻液中，按0.05%添加量接入活菌数为1.75×10~(10)个/g的T1固体菌剂，第五天时，T1固体菌剂的抑藻率可达93.5%。与探讨证实有良好溶藻效果的赖氨酸Lys相比，在实验进行第四天，工作浓度为1.27×10~6个/mL的T1菌液抑藻率比工作浓度为50ug/mL的Lys高2.7%。通过比较T1、R2、DH5α对微囊藻和蛋白核小球藻的影响，证明T1对原核铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)的生长有抑制作用，对真核蛋白核小球藻(Chlorellapyrenoidis)的生长有一定推动作用，且效果均强于R2和DH5α。本论文比较探讨了不同溶藻条件对T1菌株抑制铜绿微囊藻效果的影响，实验结果表明：在强度为2000lux,14:10(光:暗),180r/min,30℃,pH=9的条件下T1菌液的溶藻效果最佳。通过对不同发酵时间T1菌液对微囊藻905A的溶藻实验，表明在37℃,180r/min的培养条件下，T1菌株的活菌数在20h达到最大值；芽菌的孢子数在26h达到最大值1210个/mL；抑藻率在0~30h随T1菌液发酵时间的延长而不断增大，30h时达到最大值99.1%，然后保持平缓并有小幅度下降。本论文探讨了添加2%T1无菌滤液对B905-1,DH5α,H1,Z4,TRADY的影响，结果表明，T1无菌滤液对B905-1、DH5α有推动作用，对H1有抑制作用，对TRADY和Z4的生长也有抑制作用，但效果都很微弱。T1菌株对青霉素、卡那霉素、头孢霉素、链霉素的耐药性实验也说明T1是一株耐药性较低且对抗生素抗性较窄的菌株。证明在实际运用时，T1不会对环境中的微生物构成造成影响。本论文还探讨了微囊藻905与伴生菌B905-1的联系。实验结果表明，在同等条件下，含伴生菌B905-1的微囊藻905比纯培养的微囊藻905A长势更好；伴生菌B905-1对微囊藻促生作用具有特异性。关键词：铜绿微囊藻论文溶藻活性论文溶藻芽孢杆菌论文解淀粉芽孢杆菌论文藻菌联系论文
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Abstract6-11
第1章 前言11-19

1.1 水体富营养化11-15

1.1 水体富营养化的近况11

1.2 水体富营养化的理由11-12

1.3 水体富营养化的危害12

1.4 水体富营养化的治理策略12-15

1.2 溶藻细菌的探讨进展15-17

1.2.1 溶藻细菌的探讨近况15-16

1.2.2 溶藻细菌的溶藻方式及溶藻机理16-17

1.3 本课题探讨的目的、作用及主要内容17-19

1.3.1 探讨的目的和作用17-18

1.3.2 主要探讨内容18-19

第2章 T1 菌株的分类鉴定及其溶藻作用19-49

2.1 材料与策略19-29

2.

1.1 实验材料19-22

2.

1.2 实验策略22-29

2.2 结果与浅析29-46

2.1 T1 溶藻芽孢杆菌鉴定29-32

2.2 培养基对 T 1 菌株溶藻活性的影响32

2.2.3 添加量为 2 % 的 T1 和 R2 菌株对微囊藻 905 A 和蛋白核小球藻 415 的影响32-33
2.2.4 添论文导读：析52-623.2.1T1固体菌剂的制备52-533.2.2T1固体菌剂溶藻放大实验53-543.2.3T1固体菌剂对安陆野生型微囊藻的影响54-553.2.4三种不同发酵时间液体菌剂对微囊藻905的影响55-583.2.5不同添加量R2、T1液体菌剂对微囊藻905及野生藻①的影响58-603.2.6T1液体菌剂室内、室外对微囊藻90

5、野生藻①的影响60-623.3

加量为 1 % 的 T1 和 R2 菌株对微囊藻 905 A 藻液中藻细胞数和叶绿素 a 含量的影响33-35
2.2.5 不同添加量 T1、 R 2 及解淀粉芽孢杆菌 ACCC 10225 菌液对微囊藻 905A 的影响35-36

2.6 不同条件下 T1 菌株对微囊藻 905A 的影响36-40

2.7 T1 和 DH5α菌株对蛋白核小球藻 415 的影响40-41

2.8 赖氨酸 Lys 和 T1 菌液对微囊藻 905 A 的影响41-42

2.9 蛋白酶 K 对溶藻效果的影响42-43

2.10 T1 菌株无菌滤液抗细菌实验43-44

2.11 T1 菌株无菌滤液抗真菌实验44-45

2.12 T1 菌株耐药性实验45-46

2.3 本章小结与讨论46-49

第3章 T1 菌剂对藻细胞生长的影响49-64

3.1 材料和策略49-52

3.

1.1 材料49

3.

1.2 策略49-52

3.2 结果与浅析52-62
3.

2.1 T1 固体菌剂的制备52-53

3.

2.2 T1 固体菌剂溶藻放大实验53-54

3.

2.3 T1 固体菌剂对安陆野生型微囊藻的影响54-55

3.

2.4 三种不同发酵时间液体菌剂对微囊藻 905 的影响55-58

3.2.5 不同添加量 R

2、 T 1 液体菌剂对微囊藻 905 及野生藻①的影响58-60

3.2.6 T1 液体菌剂室内、室外对微囊藻 90

5、野生藻①的影响60-62

3.3 本章小结与讨论62-64
第4章 微囊藻 905 与伴生细菌 B905-1 的特异性联系64-71

4.1 材料与策略64-65

4.

1.1 材料64

4.

1.2 策略64-65

4.2 结果与讨论65-69
4.

2.1 四种分离菌株的分子鉴定65-66

4.

2.2 微囊藻 905 A 与微囊藻 905 的生长情况比较66-67

4.2.3 B905-

1、 DH5 α菌株对微囊藻 905 A 的影响67-69

4.3 本章小结与讨论69-71
总结71-73
参考文献73-78
致谢78-79
附录 A79-84
附录 B84-93
攻读学位期间的探讨成果93