简谈磷酸酯白念珠菌CaPTC5，CaPTC6和CaPTC7基因互作

论文导读：本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要3-4ABSTRACT4-7第一章文献综述7-171.1酵母菌介绍7-101.1.1酿酒酵母介绍7-81.1.2白念珠菌介绍8-101.2蛋白磷酸酯酶10-161.2.1酿酒酵母中的PP2C类蛋白磷酸酯酶12-141.2.2白念珠菌中的PP2C类蛋白磷
摘要：酵母因其固有的特点常被用作科学探讨，酿酒酵母更是因为其具有可以相互转换的单倍体和二倍体两种生长形式，而被用作真核生物探讨的方式生物。真核生物中蛋白质的可逆磷酸化是细胞信号传导途径中的一个关键调控机制，蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶分别调控底物的磷酸化状态以而实现胞内信号途径的激活或失活，进而影响细胞的生殖、分化、形态转换以及细胞凋亡。蛋白磷酸酯酶主要分为酪氨酸蛋白磷酸酶(Protein Tyrosine Phosphatase)、丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酯酶(ProteinSerine/Threosine Phosphatase)和双特异性蛋白磷酸酶(DualSpecific Typhosphatase)三个家族。Ser/Thr蛋白磷酸酯酶是胞内最重要的一类蛋白磷酸酯酶的亚家族，其中2C类蛋白磷酸酯酶是一类特异依赖于镁离子或锰离子的单体酶。目前已鉴定得出酿酒酵母中七个2C类蛋白磷酸酯酶，分别是ScPtc1p、ScPtc2p、ScPtc、ScPtp、ScPtc5p、ScPtc6p和ScPtc7p。白念珠菌中也有着七个2C类蛋白磷酸酯酶，它们分别是CaPtc1p、CaPtc2/、CaPtp、CaPtc5p、CaPtc6p、CaPtc7p和CaPtc8p。探讨发现酿酒酵母以及白念珠菌Ptc5p、Ptc6p、Ptc7p均定为于线粒体中。白念珠菌中单独缺失掉CaPTC5、CaPTC6、或者CaPTC7却未体现出任何表型。为了进一步探讨它们的功能，本实验进一步构建了白念株菌的ptc5ptc6、ptc5ptc7双基因缺失株，以及三基因缺失株—ptc5ptc6ptc7。表型筛选结果表明，PTC6和PTC7应对酮康唑和氟康唑压力胁迫时具有基因互作效应。关键词：白念珠菌论文蛋白磷酸酯酶论文CaPTC5论文CaPTC6论文CaPTC7论文
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ABSTRACT4-7
第一章 文献综述7-17

1.1 酵母菌介绍7-10

1.1 酿酒酵母介绍7-8

1.2 白念珠菌介绍8-10

1.2 蛋白磷酸酯酶10-16

1.2.1 酿酒酵母中的 PP2C 类蛋白磷酸酯酶12-14

1.2.2 白念珠菌中的 PP2C 类蛋白磷酸酯酶14-16

1.3 本论文的探讨内容及作用16-17

第二章 实验材料与策略17-31

2.1 实验材料17-25

2.

1.1 实验用菌株、质粒以及引物17-19

2.

1.2 实验试剂19-20

2.

1.3 实验室所用试剂盒20

2.

1.4 实验所用溶液及其配制20-22

2.

1.5 实验用培养基22-24

2.

1.6 实验仪器24-25

2.2 实验策略25-31

2.1 菌株的传代与保存25

2.2 碱裂解法制备质粒 DNA25-26

2.3 质粒转化大肠杆菌感受态细胞26-27

2.4 白念株菌基因组的提取27

2.5 PCR 反应系统的建立27-29

2.6 酶切反应系统的建立29

2.7 连接系统的建立29-30

2.8 倍比稀释30

2.9 图像的采集和处理30

2.10 生物信息学策略30-31

第三章 实验结果与讨论31-55

3.1 敲除盒的构建31-40

3.

1.1 p5921-CaPTC5AB 敲除盒的构建31-34

3.

1.2 pMD18-CaHis1-CaPTC5CD 敲除盒的构建34-36

3.

1.3 pMD18-CaURA3-CaPTC5CD 敲除盒的构建36-40

3.2 缺失株的构建40-53
3.

2.1 CaPTC5 CaPTC6 缺失株的构建40-45

3.

2.2 CaPTC5 CaPTC7 缺失株的构建45-50

3.

2.3 CaPTC5 CaPTC6 CaPTC7 缺失株的构建50-53

3.3 缺失株的表型筛选结果53-55
第四章 总结与展望55-56

4.1 工作总结55

4.2 展望55-56

参考文献56-61
发表论文和科研情况说明61-62
致谢62