谈谈基因中国荷斯坦牛乳中脂肪酸变化规律及其与脂肪酸合成相关基因关联

论文导读：
摘要：本探讨以扬州大学实验农牧场323头中国荷斯坦奶牛作为探讨对象,气相色谱法测定奶牛乳中脂肪酸,采取一般线性模型浅析季节、胎次、泌乳阶段及炎对乳脂肪酸组成的影响,并利用PCR-SSCP结合测序的策略探讨与乳脂肪酸合成相关的乙酰辅酶A去饱和酶1基因(SCD1)、脂肪酸合成酶基因(FASN)及二酰基甘油酰基转移酶1基因(DGAT1)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphis, SNPs),并采取一般线性模型浅析三个候选基因对乳脂肪酸组成的影响。探讨结果表明：(1)气相色谱仪可检出乳中21种脂肪酸,共约22.86mg/mL。饱和脂肪酸：单不饱和脂肪酸：多不饱和脂肪酸的比例约为63：28：9；短链脂肪酸：中链脂肪酸：长链脂肪酸的比例约为4：10：86。(2)季节对脂肪酸总含量,脂肪酸饱和度及碳链长度比值均有极显著影响(P0.01)；胎次对脂肪酸总含量有极显著影响(P0.01),对脂肪酸碳链长度比值有显著影响(P0.05),对脂肪酸饱和度无显著影响；泌乳中期和泌乳后期脂肪酸绝对含量没有显著差别,但脂肪酸饱和度及碳链长度比值均有显著差别(P0.05)；炎对脂肪酸总含量有显著影响(P0.05),但对脂肪酸饱和度及碳链长度比值无显著影响。(3)SCDl基因外显子5上有着2个SNPs,分别为g.10329CT,g.10213TC,只有g.10329CT导致丙氨酸变成缬氨酸,两个位点都处于Hardy-Weinberg平衡。10329bp突变位点的TT基因型比CC基因型具有更高的脂肪酸绝对含量,TT基因型显著降低了单不饱和脂肪酸的相对含量(P0.05),对总不饱和度有显著负效应(P0.05)。(4)FANS基因外显子34上发现1个SNP(g.16009AG),导致了苏氨酸变成丙氨酸,处于Hardy-Weinberg平衡。AA基因型总脂肪酸含量高于AB、BB型,但短链脂肪酸绝对含量较低。该突变位点对乳脂肪酸的饱和度无显著影响,但AA基因型的s-FA%显著低于BB型(P0.05)。(5)DGAT1基因外显子8在10433和10434bp位点发生了AA-GC双碱基突变,导致赖氨酸变成为丙氨酸,处于Hardy-Weinberg平衡。该突变位点对乳中脂肪酸的绝对含量和相对含量的影响均未达到显著水平。关键词：中国荷斯坦奶牛论文脂肪酸论文季节论文胎次论文泌乳阶段论文炎论文SCD1基因论文FASN基因论文DGAT1基因论文
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ABSTRACT5-10
第一章 文献综述10-19
1 脂肪酸概述10-12

1.1 脂肪酸介绍10

1.2 脂肪酸的分类10-11

1.3 脂肪酸的功能11-12

2 牛奶中脂肪酸概况12

2.1 牛奶成分介绍12

2.2 牛奶品质鉴定指标12

2.3 牛奶脂肪酸组成12

3 脂肪在奶牛机体的吸收代谢机理及养分流量12-14

3.1 脂肪酸的消化吸收机理12-13

3.2 脂类在奶牛瘤胃中的转化13

3.3 乳腺脂肪合成13-14

4 乳中脂肪酸组成影响因素14-15
5 脂肪酸合成相关基因的探讨概况15-17

5.1 SCD1基因探讨概况15-16

5.2 FASN基因探讨概况16

5.3 DGAT1基因探讨概况16-17

6 本试验的目的及作用17-19
第二章 中国荷斯坦牛乳脂肪酸变化规律探讨19-36

1. 材料与策略19-21

1.1 材料19

1.1 实验材料采集19

1.2 主要试剂19

1.3 主要仪器设备19

1.2 实验策略19-20

1.2.1 原料奶脂肪酸的提取19-20

1.2.2 原料乳脂肪酸气相色谱测定策略20

1.3 统计浅析策略20-21

2 结果与浅析21-30

2.1 脂肪酸气相色谱法检测结果21-23

2.

1.1 37种脂肪酸甲酯标准品的定性和定量21-22

2.

1.2 原料乳待测样的定性和定量22-23

2.2 原料乳脂肪酸测定结果23-24

2.3 集约化饲养条件下原料乳脂肪酸变化规律的探讨24-30

2.3.1 测定季节对原料乳脂肪酸组成与含量的影响24-25

2.3.2 胎次论文导读：

对原料乳脂肪酸组成与含量的影响25

2.3.3 泌乳阶段对原料乳脂肪酸组成与含量的影响25

2.3.4 炎对原料乳脂肪酸组成与含量的影响25-30

3 讨论30-36

3.1 乳脂肪酸测定策略的确定30-32

3.

1.1 乳脂的抽提30-31

3.

1.2 气相色谱浅析技术31-32

3.2 乳脂肪酸组成变化规律的浅析32-36
3.

2.1 乳中各种脂肪酸分布情况32-33

3.

2.2 季节因素对乳脂肪酸组成与含量的影响33

3.

2.3 胎次对乳脂肪酸组成与含量的影响33-34

3.

2.4 泌乳阶段对乳脂肪酸组成与含量的影响34-35

3.

2.5 炎对乳脂肪酸组成与含量的影响35-36

第三章 中国荷斯坦牛乳脂肪酸合成相关基因多态性及其与乳脂肪酸组成的关联浅析36-58
1 材料与策略36-41

1.1 材料36

1.1 实验材料采集36

1.2 主要试剂36

1.3 主要仪器设备36

1.2 实验策略36-39

1.2.1 牛血液DNA的提取策略36-37

1.2.2 目的基因的PCR扩增37

1.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测37-38

1.2.4 SSCP浅析38-39

1.3 群体遗传学探讨策略39-40

1.3.1 基因频率和基因型频率的计算39

1.3.2 群体杂合度(Heterozygosity,H)39

1.3.3 多态信息含量(Polymorphi information content,PIC)39-40

1.3.4 Hardy-Weinberg平衡状态的检验40

1.4 统计浅析策略40-41

2 结果与浅析41-53

2.1 SCD1基因的SSCP浅析及其与乳脂肪酸组成与含量相关性探讨41-46

2.

1.1 SCD1基因的SSCP浅析41

2.

1.2 SCD1基因部分序列克隆测序结果41-42

2.

1.3 SCD1基因群体遗传学浅析42-43

2.

1.4 SCD1基因各位点对乳脂肪酸组成的效应43-46

2.2 FASN基因的SSCP浅析及其与乳脂肪酸组成与含量相关性探讨46-50

2.1 FASN基因的SSCP浅析46-47

2.2 FASN基因部分序列克隆测序结果47

2.3 FASN基因群体遗传学浅析47-48

2.4 FASN基因各位点对乳脂肪酸组成的效应48-50

2.3 DGAT1基因的SSCP浅析及其与乳脂肪酸组成与含量相关性探讨50-53

2.3.1 DGAT1基因的SSCP浅析50

2.3.2 DGAT1基因部分序列克隆测序结果50

2.3.3 DGAT1基因群体遗传学浅析50-51

2.3.4 DGAT1基因各位点对乳脂肪酸组成的效应51-53

3 讨论53-58

3.1 基因的遗传学浅析53-54

3.

1.1 PCR-SSCP策略53

3.

1.2 基因的群体遗传学浅析53-54

3.2 SCD1基因遗传多态性及与乳脂肪酸组成关联性浅析54-55
3.

2.1 SCD1基因遗传多态性浅析54

3.

2.2 SCD1基因多态与乳脂肪酸组成关联性浅析54-55

3.3 FASN基因遗传多态性及与乳脂肪酸组成关联性浅析55-56

3.1 FASN基因遗传多态性浅析55

3.2 FASN基因多态与乳脂肪酸组成关联性浅析55-56

3.4 DGAT1基因遗传多态性及与乳脂肪酸组成关联性浅析56-58

3.4.1 DGAT1基因遗传多态性浅析56

3.4.2 DGAT1基因多态与乳脂肪酸组成关联性浅析56-58

结论58-59
参考文献59-64
致谢64-65
攻读学位期间发表学术论文65-66