阿托伐他汀对晚期糖基化终末产物诱导人内皮细胞表达MCP-1mRNA影响及其机制探讨

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摘要：[目的]观察阿托伐他汀对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA的影响,并探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和核因子-κB(NF-κB)在阿托伐他汀抗炎效应中的作用。[方法]1胶原酶消化法人脐静脉内皮细胞,取第3至5代细胞用于实验。2倒置相差显微镜形态观察法及免疫细胞化学染色法鉴定人脐静脉内皮细胞。3实验分组:①空白对照组;②牛血清白蛋白(BSA)组:用于与AGEs(AGE-BSA)组对照;③AGEs组:不同作用浓度的AGEs(10~(-4)-10~(-1)mg/ml)与细胞共同孵育24小时;④阿托伐他汀组:不同作用浓度的阿托伐他汀(0.1、1、10μmol/L)分别与细胞孵育1小时后,加入AGEs(10~(-1) mg/ml)(③实验结果选取最佳浓度)与细胞共孵育24小时;⑤15d-PGJ2(PPAR-γ激动剂)组:15d-PGJ2(10μmol/L)与细胞孵育1小时后,加入AGEs(10~(-1)mg/ml)与细胞共孵育24小时;⑥GW9662(PPAR-γ抑制剂)组:GW9662(5000nmol/L)与细胞孵育1小时后,加入AGEs(10~(-1) mg/ml)和阿托伐他汀(1μmol/L)(④实验结果选取最佳浓度)与细胞共孵育24小时。4逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测细胞MCP-1和PPAR-γmRNA表达本科毕业论文评语。5蛋白免疫印记法(Western-blot)测细胞核内NF-κB p65毕业论文工作总结。[结果]1倒置相差显微镜下可见培养的细胞呈卵圆形或多角形,典型的铺路石样排列。经CD31、CD34染色,细胞胞浆内有棕颗粒沉着(CD31、CD34阳性)硕士论文答辩技巧。2 AGEs(10~(-4)-10~(-1)mg/ml)呈浓度依赖性促进人内皮细胞MCP-1 mRNA表达,分别是空白对照组的1.53倍、2.12倍、2.56倍、4.71倍;AGEs浓度为10~(-4)mg/ml时,细胞MCP-1 mRNA表达即增高(0.26±0.02 vs 0.17±0.04,P0.01)。3与AGEs组比较,阿托伐他汀(0.1、1、10μmol/L)呈浓度依赖性抑制细胞MCP-1 mRNA表达;阿托伐他汀浓度为1μmol/L时,细胞MCP-1 mRNA表达降低(0.63±0.11 vs 1.03±0.07,P0.01)毕业论文。4与空白对照组相比,AGEs组人内皮细胞PPAR-γmRNA表达降低(0.22±0.08 vs 0.69±0.09,P0.01),细胞核内NF-κB p65升高(0.78±0.06 vs 0.31±0.01,P0.01);与AGEs组比,阿托伐他汀(1μmol/L)组细胞PPAR-γmRNA表达升高(0.59±0.02 vs 0.22±0.08,P0.01),细胞核内NF-κB p65降低(0.40±0.03 vs 0.78±0.06,P0.01)。5与AGEs组相比,15d-PGJ2组细胞核内NF-κB p65降低(0.21±0.01 vs 0.78±0.06,P0.01)、MCP-1 mRNA表达降低(0.17±0.02 vs 0.93±0.12,P0.01);与阿托伐他汀组比,GW9662组细胞核内NF-κB p65升高(0.53±0.02 vs 0.40±0.03,P0.01)、MCP-1 mRNA表达升高(0.62±0.05 vs 0.30±0.07,P0.01)。[]1胶原酶消化法可高纯度的人脐静脉内皮细胞,为体外研究血管内皮细胞的病理生理学特性了理想实验模型;2 AGEs可下调人脐静脉内皮细胞PPAR-γmRNA表达,增强细胞NF-κB活化,促进细胞MCP-1 mRNA表达;3阿托伐他汀可减弱AGEs对人脐静脉内皮细胞PPAR-γmRNA表达的下调作用,抑制细胞NF-κB活化,降低细胞MCP-1 mRNA表达;4 PPAR-γ的激活可抑制细胞NF-κB活化,减少细胞MCP-1 mRNA表达;5阿托伐他汀可能是激活细胞PPAR-γ抑制NF-κB的活化在动脉粥样硬化防治中发挥抗炎作用的毕业论文题目。关键词：动脉粥样硬化论文阿托伐他汀论文晚期糖基化终末产物论文单核细胞趋化蛋白论文1论文过氧化物酶增体殖物激活受体论文γ论文核因子-κB论文
英文缩写词表4-5
中文摘要5-7
ABSTRACT7-10
前言10-12
：人脐静脉内皮细胞的体外培养与鉴定12-22
和方法12-17
结果17-19
讨论19-21
21-22
：阿托伐他汀对晚期糖基化终末产物诱导人内皮细胞表达MCP-1 m RNA 的影响及其机制22-39
和方法23-30
结果30-35
讨论35-38
38-39
参考文献39-43
综述43-54
参考文献50-54
附录54-55
致谢55