MicroRNA-148a/b在胃癌中表达及其功能与机制探讨

论文片段—25个核苷酸片段的非编码的小分子RNA,其与靶mRNA3‘非翻译区,在转录后形成RNA诱导的基因沉默复合体影响mRNA的翻译,从而发挥其生物学功能,影响生物体发育,细胞增殖、凋亡、分化等。其在肿瘤的发生、发展也的作用。胃癌作为世界上发病率、肿瘤性死亡率的疾病,像其它恶性肿瘤一样,其发生、发展也受遗传学和表观遗传学多级联的复胃癌转移论文,microRNA论文,miR-148a论文,miR-148b论文,PrPc论文,
摘要：【背景】MicroRNA是近年发现的一类长约21-25个核苷酸片段的非编码的小分子RNA,其与靶mRNA3‘非翻译区,在转录后形成RNA诱导的基因沉默复合体影响mRNA的翻译,从而发挥其生物学功能,影响生物体发育,细胞增殖、凋亡、分化等。其在肿瘤的发生、发展也的作用物流论文。胃癌作为世界上发病率、肿瘤性死亡率的疾病,像其它恶性肿瘤一样,其发生、发展也受遗传学和表观遗传学多级联的复杂调控论文。研究证明microRNA与胃癌存在密切的性,但其在胃癌的功能及潜在的机制仍然不明怎样写毕业论文。一些研究已经证实胃癌组织中存在microRNA分子的差异表达,并且发挥着促癌基因或抑癌基因的作用。参考国内外文献关于胃癌microRNA表达谱的研究,初步预测microRNA-148a/b在胃癌中差异表达,并发挥着特殊的生物学功能论文要求。本课题将对microRNA-148a/b在胃癌的表达及功能与作用机制初步的探讨。【目的】1、检测microRNA-148a/b在胃癌组织中的表达。2、研究microRNA-148a/b在胃癌中的功能本科毕业论文评语。3、构建microRNA-148a/b慢病毒表达载体本科。4、探讨microRNA-148a/b在胃癌发挥功能的可能机制。【方法】1、23例胃癌患者手术切除后的肿瘤组织及癌旁组织标本,提取组织中的总RNA,qPCR检测microRNA-148a/b在癌组织和癌旁组织中的相对表达量,使用相对定量法分析其表达差异中专毕业论文。2、运用microRNA-148a/b-mimics化学合成物,脂质体瞬时转染的方法,转染人胃癌MKN28 , SGC7901细胞,使胃癌细胞内microRNA-148a/b升高,划痕和transwell迁移实验,测定其对胃癌细胞迁移能力的影响。3、构建microRNA-148a/b慢病毒过表达载体,经测序鉴定正确后,病毒的包装与滴度检测学年论文。并用构建好的microRNA-148a/b慢病毒表达载体感染人胃癌SGC7901细胞,qPCR鉴定microRNA-148a/b在感染细胞中的表达效果。4、运用生物信息学分析软件TargetScan、MiRanda预测microRNA-148a/b可能的靶基因,并对预测结果应用DID数据库功能聚类分析,选择与抑制细胞侵袭、迁移能力的抑癌基因论文范文网。对其预测的靶基因编码蛋白用Western-blot方法检测其在microRNA-148a/b上调胃癌细胞MKN28内的表达变化。【结果】1、MicroRNA-148a/b在胃癌组织中表达低于相对应的癌旁组织。2、划痕实验和transwell实验提示,运用miR-148a/b-mimics脂质体瞬时转染使胃癌细胞MKN28和SGC7901内miR-148a/b升高,肿瘤细胞迁移能力减弱。3、成功构建了microRNA-148a和microRNA-148b的两个慢病毒表达载体,经双酶切电泳及测序鉴定正确。用构建好的慢病毒载体感染人胃癌SGC7901细胞, qPCR鉴定其表达效果,结果能上调microRNA-148a/b在细胞内的表达财务管理论文。4、生物信息学预测PrPc为microRNA-148a/b的可能靶基因之一,Western-bolt结果,在microRNA-148a/b上调的胃癌细胞MKN28内, PrPc表达降低。【】1、MicroRNA-148a/b在胃癌组织中低表达大学生毕业论文。在体外,上调microRNA-148a/b后能抑制胃癌细胞的迁移能力哲学论文。提示其可能为一个抑癌基因,起到抑制胃癌侵袭、转移的作用论文格式范文。2、PrPc为micriRNA-148a/b可能的靶基因之一,提示其可能抑制PrPc的表达而发挥抑制胃癌侵袭和转移。关键词：胃癌转移论文microRNA论文miR-148a论文miR-148b论文PrPc论文
缩略语表6-8
中文摘要8-11
Abstract11-15
前言15-17
文献回顾17-36
MiR-148a/b 在胃癌中的表达水 平检测36-46
1 36-37
2 方法37-40
3 结果40-43
4 讨论43-46
MiR-148a/b 抑制胃癌的侵袭和 迁移46-58
1 46-47
2 方法47-51
3 结果51-56
4 讨论56-58
MiR-148a/b 慢病毒表达载体 的构建与鉴定58-84
实验

一、MicroRNA-148a/b 过表达慢病毒 载体构建58-73

1 58-60
2 方法60-72
3 结果72-73
实验

二、microRNA 过表达慢病毒载体的包装与滴度检测73-79

1 74
2 方法74-76
3 结果76-79
实验

三、microRNA-148a/b 过表达慢病毒载体效果鉴定79-84

1 79
2 方法79-80
3 结果80-82
4 讨论82-84
MiR-148a/b 靶基因的生物信息 学分析及验证84-91
1 84-86
2 方法86-87
3 结果87-89
4 讨论89-91
小结91-92
参考文献92-105
个人简历和研究成果105-106
致谢106-107