阐述代谢基于液质联用技术HIV/AIDS脾肺气虚证与湿热内蕴证患者尿液代谢组学要求

论文导读：中的化学变化及其生物学作用。艾滋病是因感染人类免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)而引起的慢性致死性传染病,在世界范围内已呈现显著的上升走势,其对社会产生的影响已经成为全球高度重视的重大公共卫生不足和社会不足。通过运用代谢组学的探讨策略,寻找爱滋病患者尿液中的特异代谢产物,及爱滋病中医不同证型
摘要：目的：代谢组学是一门新兴科学,已广泛运用于医学领域,它通过运用质谱(MS)、色谱、核磁共振(NMR)等现代仪器检测浅析手段,定性或定量探讨观察生物样本中所有可检测的代谢产物的综合体现,探讨生物体对外源性物质以及遗传变异的应答等所引起的病理生理变化反应,将这些变化反应与代谢信息中的生物学相关事件联系起来,以检测活细胞中的化学变化及其生物学作用。艾滋病是因感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)而引起的慢性致死性传染病,在世界范围内已呈现显著的上升走势,其对社会产生的影响已经成为全球高度重视的重大公共卫生不足和社会不足。通过运用代谢组学的探讨策略,寻找爱滋病患者尿液中的特异代谢产物,及爱滋病中医不同证型间的差别物质,为中医辨证施治和中医诊断的量化建立新的手段,为中医药在诊断和防治艾滋病进展中的作用提供先进的技术支持。策略：本探讨选取具有代表性的艾滋病基本证候中脾肺气虚证和湿热内蕴证患者作为探讨对象,病例来源于河南省的艾滋病患者,西医诊断标准采取国家卫生部2005年推荐《艾滋病诊疗指南》诊断标准。中医诊断标准目前尚无国家标准或行业标准,本项目采取前期课题成果"HIV/AIDS常见证候诊断量表”中符合脾肺气虚证和湿热内蕴证的标准。实验策略：实验初期先做正常人预实验以确定实验的具体策略和条件参数。收集本探讨入组对象晨尿2m1作为受试样品,放于-20℃保存一周转移至-80℃冰箱备用。尿样前期处理：尿液处理前,先在室温下解冻,移取1m1尿液,4000r/min高速离心10min,取上清液。精密移取上清液300μ L,置1.5m1离心管中,加入600u L甲醇,用混匀器混匀约10min,然后高速离心10min,14000r/min,4℃控温,取上清液800μ L,用0.45μm滤膜过滤,即得供试品溶液。液相色谱条件色谱柱为Agilent Zorbax C18(150×2.1mm,3.1μm);流动相：0.2%冰醋酸水-甲醇梯度洗脱(见附表2)；流速：0.2ml/min;进样盘温度：4℃；进样量：20u L;柱温：30℃；色谱图采集时间不少于60min。质谱条件扫描方式：一级全扫描,鞘气流速：40bar,辅助气流速：10bar,喷雾电压：4kv,毛细管电压：-4v,毛细管温度：300℃,质荷比范围：80-1000,采取负离子扫描方式。经上样前处理后,运用液质联用技术(HPLC-MS)浅析尿液成分,经质谱浅析仪器自带软件导出原始数据(质荷比对应的峰强度)Excel文件,对数据进行筛选,筛选原则为：每个证型中相同质荷比(数据上下浮动在±1的定义为同一类物质)。采取SPSS13.0软件和SIMCA-P软件对数据进行T检验浅析、聚类浅析、PCA方式识别浅析处理。结果：数据经T检验浅析,结果显示：P值0.05有显著的统计学作用。根据T检验结果、聚类浅析结果、PCA浅析结果可以看出运用代谢组学的策略可以很好的将正常组和艾滋病病人组及艾滋病病人肺脾气虚证和湿热内蕴证组间进行很好的鉴别,两组之间有着着显著的差别性。综合T检验和相应的plot图中可以看到在正常组与艾滋病病人组中质荷比为794、412、505、213、368、118、618、388、159、101、109、210、192、124的物质有着显著的差别；在正常组和艾滋病脾肺气虚证组中质荷比为412、794、505、118、329、352、388、618、562、502、560、159、384、109、101、117、125、339的物质有着显著的差别；在正常组和艾滋病湿热内蕴组中质荷比为412、794、368、157、125、109、210、124、192、182的物质有着显著的差别；在艾滋病脾肺气虚证组和艾滋病湿热内蕴证组中质荷比为521、331、376、121、338、151的物质有着显著的差别。结论：1.艾滋病病人和正常人尿液代谢轮廓均有良好的区分。2.发现了一些可能有着的潜在标志物,如质荷比为794、412、388、118的物质,有助于艾滋病临床微观指标的诊断,对其量化有一定的作用。3.代谢组学的探讨策略有望成为诊断及判别艾滋病中医证型的新手段。关键词：艾滋病论文代谢组学论文中医证候论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要5-7
Abstract7-10
前言10-14
艾滋病的概说10
西医学对艾滋病的认识10
中医学对艾滋病病因病机的认识10-12
代谢组学的探讨近况12
代谢组学与中医证候学相关性探讨12-14
实验策略与步骤14-20
1 探讨对象14-15
2 材料和样品前期论文导读：色谱-质谱条件175液质联用浅析策略学考察17-186代谢组学浅析18-20实验结果20-361一般资料浅析结果20-212T检验结果21-263聚类浅析结果26-274主成分浅析结果27-355综合浅析35-36讨论36-381论述探讨36-372结果浅析37-38结论38-39致谢39-40参考文献40-43附录43-55附件1：附图44-47附件2：附表47-50附件3：文献综述50-55参
处理策略15
3 实验条件的筛选和确立15-17
4 液相色谱-质谱条件17
5 液质联用浅析策略学考察17-18
6 代谢组学浅析18-20
实验结果20-36
1 一般资料浅析结果20-21
2 T检验结果21-26
3 聚类浅析结果26-27
4 主成分浅析结果27-35
5 综合浅析35-36
讨论36-38
1 论述探讨36-37
2 结果浅析37-38
结论38-39
致谢39-40
参考文献40-43
附录43-55
附件1：附图44-47
附件2：附表47-50
附件3：文献综述50-55
参考文献53-55
附件4：在校发表论文及科研情况55