简述层析生物标志物传感技术

论文导读：
摘要：慢性病是进行性的、不能自然痊愈及很少能够完全治愈的一类疾病,其所包含的疾病主要有糖尿病、高血脂、冠心病、脑卒中、高血压、肿瘤等。慢性病已经成为全世界几乎所有国家成年人的最主要死因,而生物标志物监测是实现慢性病二级预防(早发现、早诊断、早治疗)和对症治疗的基础,制约慢性病快速增加的基本途径。本论文主要探讨多种慢性病相关生物标志物快速检测的策略和实现途径,助力医院临床生物标志物快速测试以及家庭自测,特别是糖尿病、高血脂、痛风及肿瘤患者的自我监测。探讨工作主要包括以下几个方面：(1)电化学酶传感技术探讨解决了电化学酶传感器的准确性、一致性和稳定性不足。基于双电极测试系统中电子媒介体作用的新机制,选择适当的检测电压来减少干扰物发生电极反应的概率。选用微反应腔和快速水合的传感层来缩短响应时间,使得电子媒介体的反应比干扰反应优先进行,进一步消除样品中有着的其它电活性物质的干扰。由于电子媒介体、双电极检测技术和短检测时间等因素的协同作用,所制备的尿酸、葡萄糖、胆固醇生物传感器均具有良好的抗干扰能力。正常生理性内源物质基本不干扰测定,外源性药物除极端高值外亦不干扰。采取丝网印刷技术一步完成传感试剂的固定,简化了制备工艺,并且提升了传感器间的一致性。通过优化传感层印浆组成,提升尿酸、葡萄糖、胆固醇生物传感器的储存稳定性。所制备的尿酸传感器的保存期为12个月以上,葡萄糖传感器的保存期为18个月以上,胆固醇传感器的保存期为10个月以上(2)电化学免疫传感技术探讨以肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)为探讨对象,解决了肿瘤标志物电化学免疫传感器研制中的四个共性不足：电化学标记策略、电化学检测策略、生物识别分子的固定化策略和免疫反应方式选择。利用电活性物质甲酸二茂铁标记甲胎蛋白,通过免疫渗滤方式和竞争免疫反应,构建了甲胎蛋白免疫渗滤型电化学传感器。利用胶体金介导辣根过氧化物标记抗体,通过免疫层析方式和夹心免疫反应,构建了甲胎蛋白免疫层析型电化学传感器。采取丝网印刷技术和微量非接触点样技术批量制备了上面陈述的两种甲胎蛋白电化学免疫传感器,相比于传统免疫浅析策略(如ELISA),两种策略一致性很好。由于不需要频繁的清洗步骤,该策略操作简便,并且节省时间,适于诊所和家庭自检。(3)条带型半定量胶体金免疫层析传感技术探讨解决了胶体金免疫层析传感技术灵敏度低和不适于定量的不足,实现了三种前列腺癌肿瘤标志物的半定量检测。探讨发现：单位面积硝酸纤维素膜上固定化的抗体越多,灵敏度越高；单位数量胶体金上标记的抗体越少,灵敏度越高,但稳定性越差。但是利用牛血清白蛋白来填补胶体金表面的空位和封闭胶体金表面未和抗体结合的位点,可以稳定胶体金溶液和减少非特异性反应。采取多测试线,所制备的快速胶体金免疫层析传感器的检测限和线性范围均达到临床的要求。密封于有干燥剂的塑料袋中常温(25℃)保存,传感器稳定期大于6个月。临床实验探讨表明,该策略与ELISA检测结果符合率为97.6%,可以运用于临床,以而满足了应对前列腺癌普查筛选和预后监测等快速检测的需要。关键词：慢性疾病论文生物标志物论文生物传感器论文胶体金免疫层析浅析论文
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ABSTRACT6-16
第一章 绪论16-27

1.1 探讨背景16-19

1.1 生物标志物16-17

1.2 临床检测技术17-18

1.3 即时检测技术18-19

1.2 目前国内外探讨近况与水平19-23

1.2.1 干化学技术19-20

1.2.2 生物传感技术20-21

1.2.3 电化学酶传感技术21

1.2.4 电化学免疫传感技术21-22

1.2.5 胶体金免疫层析传感技术22-23

1.3 本课题的探讨作用及目的23-25

1.4 本探讨论文的工作内容25-27

第二章 电化学酶传感技术探讨27-51

2.1 前言27-28

2.2 实验部分28-34

2.1 仪器和设备28

2.2 主要试剂及耗材28-30

2.3 实验步骤30-34

2.3 结果与讨论34-50

2.3.1 工作原理34-37

2.3.2 干扰消除的策略37-39

2.3.3 传感层组论文导读：

成对传感器性能的影响39-42

2.3.4 传感器性能42-50

2.4 小结50-51

第三章 电化学免疫传感技术探讨51-65

3.1 前言51-52

3.2 材料与策略52-56

3.

2.1 仪器与设备52

3.

2.2 主要试剂和耗材52-53

3.

2.3 实验步骤53-56

3.3 结果与讨论56-63

3.1 电化学免疫检测原理56-57

3.2 二茂铁甲酸标记甲胎蛋白57-59

3.3 HRP和Ab双标记纳米金59-61

3.4 膜材料选择与抗体固定化61-62

3.5 电化学免疫传感器性能62-63

3.4 小结63-65

第四章 条带型半定量胶体金免疫层析传感技术探讨65-89

4.1 前言65-66

4.2 材料与策略66-77

4.

2.1 仪器与设备66

4.

2.2 主要试剂和耗材66-68

4.

2.3 实验步骤68-77

4.3 结果与讨论77-87
4.

3.1 胶体金制备及表征77-80

4.

3.2 抗体的胶体金标记80-81

4.

3.3 抗体与胶体金结合最佳浓度确定81-82

4.

3.4 膜材料的选择82-84

4.

3.5 抗体用量确定84

4.

3.6 传感器性能84-87

4.4 小结87-89
第五章 总结与展望89-92

5.1 总结89-91

5.2 展望91-92

参考文献92-100
致谢100-101
攻读学位期间主要的探讨成果101-102