对于多糖岩藻多糖硫酸酯抗肿瘤活性筛选和初步机理

论文导读：
摘要：岩藻多糖硫酸酯是一种硫酸化多糖,有着于多种可食用褐藻中,例如裙带菜、墨角藻、羊栖菜和昆布等。岩藻多糖硫酸酯具有多种生物活性,例如抗肿瘤、抗氧化、抗炎等。最近探讨表明岩藻多糖硫酸酯可以在人类淋巴癌细胞、乳腺癌细胞、结肠癌细胞以及肺癌细胞中诱导凋亡的发生,以而发挥抗肿瘤活性。细胞程序性死亡包括凋亡性程序性细胞死亡和自噬性程序性细胞死亡。细胞凋亡,也称I型程序性细胞死亡,以细胞皱缩、发泡,细胞核染色质浓缩为特点。自噬也称为Ⅱ型程序性细胞死亡,在这一历程中,细胞浆中的大分子物质和细胞器被包裹形成自噬体,随后与溶酶体融合并对自噬体内容物成分进行降解。以前的探讨表明,在机体受到外界环境刺激时或疾病状态下“,自噬对机体起到保护作用。然而,在肿瘤治疗中,自噬究竟是起保护作用还是推动细胞的互亡仍然需要进一步确定。此外,在肿瘤细胞中,对于自噬与凋亡之间联系的探讨仍不透彻,需要我们重点关注。3-Merhy ladenine(3-MA)是自噬性程序性细胞死亡通路的抑制剂。探讨表明,3-MA可以推动化学治疗剂所诱导的凋亡。例如,在结肠癌细胞中,3-MA提升了5-氟尿嘧啶所诱导的凋亡。在人宫颈癌细胞Hela(?)细胞中,3-MA同样可以上调冬凌草甲素所诱导的凋亡。在本次探讨中,我们探讨了在人宫颈癌细胞Hela细胞中,岩藻多糖硫酸酯的抗肿瘤活性。结果表明：岩藻多糖硫酸酯可以通过诱导Hela(?)田胞发生凋亡以及自噬性程序性细胞死亡,来抑制细胞的生长。凋亡的发生伴随着线粒体膜电位的下降、抗凋亡蛋白Bcl-2表达的下调以及促凋亡蛋白Bax表达的上调。形态学探讨结果表明,岩藻多糖硫酸酯作用于Hela细胞还可以导致自噬体的形成,这是自噬的一个典型的特点。此外,我们观察到岩藻多糖硫酸酯诱导Hela(?)细胞微管相关蛋白I的轻链3(LC3)-Ⅱ的表达量提升,这在一定程度上反映了细胞的自噬活性的提升。通过自噬抑制剂3-MA的利用探讨自噬与凋亡之间的联系。结果表明,抑制自噬可以提升岩藻多糖硫酸酯的凋亡诱导活性。总体来说,岩藻多糖硫酸酯可以诱导Hela(?)细胞发生凋亡以及自噬性程序性细胞死亡,自噬在此历程中对Hela(?)细胞起保护作用。关键词：岩藻多糖硫酸酯论文凋亡论文自噬论文抗肿瘤论文作用机理论文
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论文可以联系人员哦。目录4-7
CONTENTS7-10
摘要10-12
ABSTRACT12-14
符号说明14-15
第一章 前言15-23

1.1 岩藻多糖硫酸酯的探讨概况15-17

1.1 岩藻多糖硫酸酯15-16

1.2 岩藻多糖硫酸酯的抗肿瘤活性探讨进展16-17

1.2 细胞的死亡方式17-21

1.2.1 凋亡及其分子机制18-19

1.2.2 自噬及其分子机制19-21

1.4 自噬及凋亡之间的联系21

1.5 细胞凋亡及自噬与肿瘤治疗之间的联系21-22

1.5.1 凋亡调控失调是肿瘤发生的重要理由之一21-22

1.5.2 自噬与恶性肿瘤之间的联系22

1.6 本课题的探讨目的、作用和革新点22-23

第二章 岩藻多糖硫酸酯的抗肿瘤活性筛选23-29

2.1 实验材料23-25

2.

1.1 实验原料23

2.

1.2 主要试剂23

2.

1.3 主要仪器23-24

2.

1.4 溶液配制24-25

2.2 实验策略25-26

2.1 细胞培养25-26

2.2 MTT比色法检测岩藻多糖硫酸酯对肿瘤细胞的抑制活性26

2.3 统计学处理26

2.3 实验结果26-29

第三章 岩藻多糖硫酸酯诱导Hela细胞发生凋亡29-43

3.1 实验材料29-31

3.

1.1 主要试剂29

3.

1.2 主要仪器29-30

3.

1.3 溶液配制30-31

3.2 实验策略31-36
3.

2.1 MTT比色法检测岩藻多糖硫酸酯对于Hela细胞的抑制活性31-32

3.

2.2 电子显微镜下观察Hela细胞形态学转变32

3.

2.3 Hoechst33342细胞凋亡形态学染色32

3.

2.4 AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡32-34

3.

2.5 JC-1染色检测细胞线粒体膜电位34-35

3.

2.6 Western Blot analysis35-36

3.3 实验结果36-42

3.1 岩藻多糖硫酸酯对Hela细胞增殖的抑制作用36-37

3.2 岩藻多糖硫酸酯诱导Hela细胞形态发生转变37-38

3.3 岩藻多糖硫酸酯诱导Hela细胞发生凋亡38-40

3.3.4 岩藻多糖硫酸酯对Hela细胞Bcl-

2、Bax蛋白表达的影响40-42

3.4 小结42-43
第四章 岩藻多糖硫酸酯诱导Hela细胞发生自噬以及自噬与凋论文导读：2MDC荧光染色检测岩藻多糖硫酸酯诱导Hela细胞发生自噬45-464.3.3岩藻多糖硫酸酯提升了Hela细胞LC3-Ⅱ的表达46-474.3.4抑制自噬的发生可以推动岩藻多糖硫酸酯对Hela细胞的促凋亡作用47-494.4小结49-51讨论51-55参考文献55-63致谢63-65攻读学位期间发表的论文65-67学位论文评阅及答辩情况表67上一页123
亡的联系43-51

4.1 实验材料43

4.

1.1 主要试剂43

4.

1.2 溶液配制43

4.2 实验策略43-45
4.

2.1 MDC荧光染色检测自噬囊泡43-44

4.

2.2 Western blot analysis44

4.

2.3 3-MA抑制Hela细胞自趣的发生，以确定自睡与调亡之间旳联系44-45

4.3 实验结果45-49
4.

3.1 岩藻多糖硫酸酯诱导后Hela细胞形态发生转变45

4.

3.2 MDC荧光染色检测岩藻多糖硫酸酯诱导Hela细胞发生自噬45-46

4.

3.3 岩藻多糖硫酸酯提升了Hela细胞LC3-Ⅱ的表达46-47

4.

3.4 抑制自噬的发生可以推动岩藻多糖硫酸酯对Hela细胞的促凋亡作用47-49

4.4 小结49-51
讨论51-55
参考文献55-63
致谢63-65
攻读学位期间发表的论文65-67
学位论文评阅及答辩情况表67