浅析灌注SD大鼠脑缺血再灌注和丹红注射液干预后GDF-15和GDF-5表达变化

论文导读：7-33综述33-38参考文献35-38致谢38
摘要：目的：观察SD大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织中GDF-15和GDF-5的表达变化以及丹红注射液干预后两者表达的变化,初步探讨GDF-15和GDF-5在脑缺血再灌注损伤中的作用及丹红注射液的保护机制。策略：(1)动物分组：将健康SD大鼠60只,随机分为四组：正常对照组(normal group),假手术组(sham-operated group),脑缺血再灌注组(I/R group)和丹红注射液干预组。其中丹红注射液干预组和脑缺血再灌注组又分为四个亚组：六小时组(6h),一天组(1d),三天组(3d)和七天组(7d)。(2)模型制作：雄性健康SD大鼠用10%水合氯醛溶液(350mg/kg)腹腔麻醉,将其仰卧于实验台并固定,颈部行常规备皮消毒,用手术剪将阔筋膜剪开,显露出左侧胸锁乳突肌,以左侧胸锁乳突肌和颈前部肌群间向深部分离到颈总动脉(CCA),分别分离左侧CCA,颈内动脉(ICA)以及颈外动脉(ECA)。依次结扎ECA和CCA,取动脉夹夹闭ICA远心端,用眼科剪在CCA分叉下方剪一小切口,将一根预先做好的圆头鱼线插入ICA,深度为18-20mm左右,有轻微阻力感后停止插入,造成大脑中动脉阻塞引起脑缺血。结扎鱼线入口处,在外留取约1-2cm,缝合皮下组织及皮肤。2h后往外轻拉鱼线头直至稍有阻力,实现再灌注。大鼠清醒后进行评估,爬行时向左侧旋转,提尾时右前肢屈曲,出现Horner征为手术成功标志。假手术组除外插鱼线的步骤,其余同手术组。(3)HE染色观察SD大鼠前脑组织的病理变化。(4)免疫组织化学染色观察GDF-15和GDF-5的表达情况。(5)所有统计浅析均用SPSS15.0统计软件包完成。结果：(1)HE染色：正常对照组和假手术组的SD大鼠前脑组织形态结构没有显著的变化；脑缺血再灌注组根据时间点的不同可见胶质细胞增生,细胞和细胞间质水肿,神经细胞坏死。(2)免疫组化染色GDF-15的表达：正常对照组和假手术组的SD大鼠前脑组织中均有GDF-15的表达,但表达微量。缺血再灌注损伤后GDF-15的表达上调,于第一天达到高峰,以第三天开始下降,至第七天达最低,但仍高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组比p0.05,不同时间点比较p0.05)。(3)免疫组化染色GDF-5的表达：正常对照组和假手术组的SD大鼠前脑组织几乎无GDF-5的表达,在脑缺血再灌注后表达显著增高,于第一天达到高峰,以第三天开始下降,至第七天达最低,但仍高于正常组和假手术组(与正常组和假手术组比p0.05,不同时间点比较p0.05)。(4)GDF-15和GDF-5在SD大鼠缺血再灌注前脑组织中的表达走势相同,呈正相关的联系(p0.05)。(5)丹红注射液干预后,与同一时间点的缺血再灌注组比较,胶质细胞增生,细胞和细胞间质水肿,神经细胞坏死程度均较轻,存活的细胞数更多。第1d、3d、7d时,GDF-15和GDF-5的水平较缺血再灌注组表达更高(p0.05)。结论：(1)缺血再灌注的SD大鼠前脑组织中GDF-15和GDF-5表达均升高且呈正相关；(2)丹红注射液在SD大鼠缺血再灌注模型中具有神经保护作用,其神经保护作用可能与转变GDF-15和GDF-5的表达水平有关；关键词：脑缺血再灌注论文GDF-15论文GDF-5论文丹红注射液论文SD大鼠论文
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Abstract6-8
目录8-9
縮略词表9-10
第一章 前言10-12
第二章 材料与策略12-15

2.1 实验材料和仪器12

2.2 实验步骤和策略12-14

2.3 统计浅析14-15

第三章 结果15-21

3.1 病理观察结果15

3.2 免疫组化结果15-16

3.3 图和表16-21

第四章 讨论21-26
第五章 结论26-27
参考文献27-33
综述33-38
参考文献35-38
致谢38