对于载玻片功能化载玻片修饰策略及其在细胞中运用

最后更新时间：2024-03-20 作者：用户投稿原创标记

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论文导读：
摘要：细胞黏附历程是生物重要的生理历程,大多数细胞都要依赖在表面的黏附、伸展、繁殖行为而进行正常的生理活动。在宫颈癌的筛查策略中,液基细胞学技术是以载玻片作为脱落细胞的黏附基底。探讨载玻片的修饰策略,增强细胞在基质上的黏附,在实际疾病诊断中可以提升诊断的准确率。本论文将生物相容性材料修饰到载玻片表面,并在液基细胞学技术中进行运用,发现利用多聚赖氨酸、壳聚糖、胶原蛋白等细胞相容性材料对载玻片基底进行修饰后,可以增强宫颈脱落细胞在基底上的黏附作用,减少在制作细胞涂片历程中,以及在染色历程中的脱片现象,以提升诊断准确性。据此,本论文按以下三部分进行探讨：第一部分硅烷化试剂GOPS与多聚-L-赖氨酸双修饰载玻片修饰策略的建立及其在液基细胞学中的运用在载玻片上利用3-甘油丙基三甲氧基硅烷(GOPS)进行修饰后,得到表面为环氧键的载玻片；然后将环氧键打开与多聚-L-赖氨酸(PLL)的氨基结合,得到GOPS-PLL双重修饰的载玻片。利用X射线光电子能谱仪(XPS)和原子力显微镜(AFM)对修饰后的载玻片表面进行表征。利用宫颈脱落细胞探讨修饰后的载玻片对细胞的黏附效果。将宫颈脱落细胞样品制成细胞涂片,经巴氏染液染色后,置于显微镜下观察、拍照。空白载玻片、传统的PLL修饰的载玻片进行对照实验。结果显示,宫颈脱落细胞在对照载玻片和GOPS-PLL修饰的载玻片上的黏附数量分别为：1030±300、3283±226和4119±280(n=12)。细胞黏附数量在不同的修饰策略间,具有显著性差别(P0.05,ANOVA检验)。GOPS-PLL修饰的载玻片对宫颈脱落细胞的黏附效果及均匀度均较未经修饰及传统的PLL修饰的载玻片要好,用该种策略修饰的载玻片有望运用到液基细胞学技术中,对疾病进行诊断,以提升诊断的准确率。第二部分壳聚糖功能化的载玻片对Hela细胞的黏附探讨及其在液基细胞学中的运用在载玻片基底上,利用3-氨基三乙氧基硅烷(APTES)对载玻片进行氨基化修饰,通过戊二醛交联并与壳聚糖反应后,得到壳聚糖修饰的载玻片。利用原子力显微镜(AFM)对其表面形貌进行表征并计算粗糙度。探讨宫颈癌Hela细胞在壳聚糖修饰的载玻片上的黏附、生长情况,并筛选出对Hela细胞黏附效果较好的载玻片。将其进行宫颈脱落细胞的黏附实验,将宫颈脱落细胞样品制作成细胞涂片,经HE染液染色后,置于显微镜下观察、拍照。在空白论文导读：胶原蛋白利用化学法直接修饰于载体表面,另一种策略是将胶原蛋白嫁接到1%壳聚糖处理后的基质表面。利用原子力显微镜(AFM)对经过修饰后的载玻片的表面进行表征,并比较这两种不同的修饰策略得到的载玻片对宫颈脱落细胞的黏附行为。将宫颈脱落细胞样品涂布于修饰后的载玻片上,制成细胞涂片,经HE染液染色后,置于显微镜下观察、拍
载玻片上进行对照实验。结果显示,壳聚糖修饰的载玻片,对宫颈脱落细胞的有较好的黏附效果,染色后的细胞形态清晰、颜色鲜亮,便于病理医生进行诊断。用该种策略修饰的载玻片有望运用于液基细胞学技术中,进行疾病诊断,以提升诊断的准确率。第三部分胶原蛋白功能化载玻片的修饰策略建立及其在液基细胞学中的运用利用胶原蛋白,经过两种不同的载体修饰的策略修饰载玻片：一种策略是将胶原蛋白利用化学法直接修饰于载体表面,另一种策略是将胶原蛋白嫁接到1%壳聚糖处理后的基质表面。利用原子力显微镜(AFM)对经过修饰后的载玻片的表面进行表征,并比较这两种不同的修饰策略得到的载玻片对宫颈脱落细胞的黏附行为。将宫颈脱落细胞样品涂布于修饰后的载玻片上,制成细胞涂片,经HE染液染色后,置于显微镜下观察、拍照。对照实验在未经修饰的载玻片上进行。结果显示,两种修饰策略后的胶原蛋白载玻片,对宫颈脱落细胞的黏附效果均较未经修饰的载玻片效果要好,细胞形态清晰。用该种策略修饰的载玻片有望运用于疾病诊断中,以提升诊断的准确率。关键词：细胞浅析论文功能化载玻片论文壳聚糖论文胶原蛋白论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要4-7
ABSTRACT7-13
第一部分：绪论13-20

1.1 液基细胞学技术介绍13-15

1.2 基底修饰的策略及其与细胞间的相互作用15-18

1.2.1 细胞黏附的本质16

1.2.2 材料修饰的策略与细胞间的相互作用16-18

1.3 本论文的探讨内容和作用18-20

第二部分：硅烷化试剂GOPS与多聚-L-赖氨酸双修饰载玻片策略的建立及其在液基细胞学中的运用20-32

2.1 前言20-21

2.2 原料与试剂21

2.3 仪器21

2.4 实验策略21-23

2.4.1 载玻片基质的预处理21

2.4.2 载玻片的修饰21-22

2.4.3 载玻片的表征22

2.4.4 细胞涂片的制备、染色与观察22-23

2.5 结果与讨论23-31

2.5.1 载玻片修饰原理23-24

2.5.2 载玻片的表征24-27

2.5.3 宫颈脱落细胞涂片的制作27-29

2.5.4 细胞涂片的观察29-30

2.5.5 细胞计数及统计学浅析30-31

2.6 结论31-32论文导读：计学浅析52-534.6结论53-54结论54-55参考文献55-66致谢66-67硕士期间发表论文67上一页123

第三部分壳聚糖修饰的载玻片对Hela细胞的黏附探讨及其在液基细胞学中的运用32-45

3.1 前言32-33

3.2 原料与试剂33-34

3.3 仪器34

3.4 实验策略34-36

3.4.1 载玻片的预处理34

3.4.2 壳聚糖功能化载玻片的制备34

3.4.3 载玻片的表征34-35

3.4.4 细胞的培养和黏附实验35

3.4.5 脱落细胞涂片的制作、染色、观察35-36

3.5 结果与讨论36-44

3.5.1 壳聚糖功能化载玻片的修饰历程36

3.5.2 载玻片的表征36-40

3.5.3 细胞黏附实验40-41

3.5.4 细胞计数41-42

3.5.5 脱落细胞涂片的制作42

3.5.6 细胞涂片的观察42-43

3.5.7 细胞计数及统计学浅析43-44

3.6 结论44-45

第四部分胶原蛋白功能化的载玻片修饰策略建立及其在液基细胞学中的运用45-54