探讨氟化钠氟化钠、亚砷酸钠对大鼠肝细胞BRL-3A联合毒性作用

论文导读：联系人员哦。中文摘要4-6Abstract6-8前言8-10材料与策略10-221材料10-122策略12-22结果22-351氟化钠、亚砷酸钠对BRL-3A细胞形态的影响22-232HE染色结果23-243氟化钠、亚砷酸钠对大鼠正常肝细胞BAL-3A增殖的影响24-274氟、砷染毒对BRL-3A细胞培养上清液中ALT、
摘要：目的：用不同浓度的氟化钠、亚砷酸钠对体外培养的大鼠肝细胞进行染毒，探讨氟和砷对大鼠肝细胞的损伤及其联合毒作用，阐明其致肝细胞损伤的机制，为氟砷联合作用对肝脏的综合毒性评定提供论述依据。策略：将体外培养至80%左右融合的大鼠BRL-3A细胞按下列策略处理：正常对照换以不含毒物的无血清DMEM培养基培养；单独亚砷酸钠染毒：分别用亚砷酸钠浓度为1.0×10~(-3)mol/L、1.0×10~(-4)mol/L、1.0×10~(-5)mol/L、1.0×10~(-6)mol/L、1.0×10~(-7)mol/L的无血清DMEM培养基培养；单独氟化钠染毒：分别用氟化钠浓度为1.0×10~(-1)mol/L、1.0×10~(-2)mol/L、1.0×10~(-3)mol/L、1.0×10~(-4)mol/L、1.0×10~(-5)mol/L的无血清DMEM培养基培养；氟砷联合染毒：用同时加入氟化钠和亚砷酸钠的无血清DMEM培养，培养基中氟化钠浓度为1.0×10-3mol/L，亚砷酸钠浓度分别为1.0×10~(-4)mol/L、1.0×10~(-5)mol/L、1.0×10~(-6)mol/L。染毒24小时后HE染色法观察细胞形态结构变化，MTT法检测细胞增殖情况，同时检测培养液中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的活性；再分别用二硫对硝基苯甲酸（DTNB）法、黄嘌呤氧化酶法、硫代酸法检测培养液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛（MDA）含量，并通过定量实时聚合酶链式反应（Q_PCR）测定大鼠BRL-3A细胞Bcl-2mRNA表达水平。结果：1）氟化钠、亚砷酸钠染毒24小时后大鼠BRL-3A细胞收缩、变细、体积变小；细胞数量显著减少，双核细胞减少，细胞胞核固缩，有的细胞内出现空泡；较多细胞脱落，细胞间隙变宽，形成一片片的细胞脱失区。2）氟化钠、亚砷酸钠均对大鼠肝细胞的增殖产生了抑制作用（P＜0.05），且随着浓度的增加，增殖抑制率增加；氟化钠与亚砷酸钠对BRL-3A细胞增殖抑制的交互作用有统计学作用（P＜0.01），交互作用呈拮抗作用。3）氟化钠、亚砷酸钠增加了BRL-3A细胞培养物中ALT、AST活性（P＜0.05）；氟化钠与亚砷酸钠对ALT、AST活性影响的交互作用具有统计学作用（P＜0.05），交互作用呈拮抗作用。4）氟化钠、亚砷酸钠降低了细胞GSH－Px、SOD活性（P＜0.05）、提升了培养液中MDA的浓度（P＜0.05）；氟化钠与亚砷酸钠对GSH－Px、SOD、MDA的交互作用具有统计学作用（P＜0.01），其交互作用呈拮抗作用。5）氟化钠、亚砷酸钠均抑制了BRL-3A细胞中的Bcl-2mRNA表达（P＜0.05），氟化钠与亚砷酸钠对BRL-3A细胞中的Bcl-2mRNA表达影响的交互作用具有统计学作用（P＜0.01），交互作用呈拮抗作用。结论：1）氟、砷能引起BRL-3A细胞形态转变，可抑制大鼠BRL-3A细胞的增殖。2）氟、砷染毒可影响BRL-3A细胞的氧化应激系统，使GSH－Px、SOD活性降低，MDA浓度增高。3）氟、砷染毒引起可导致BRL-3A细胞内的Bcl-2基因表达下降。4）氟和砷对BRL-3A细胞的损伤有着交互作用，其联合作用方式体现为拮抗作用。关键词：大鼠肝细胞论文氟化钠论文亚砷酸钠论文联合作用论文
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Abstract6-8
前言8-10
材料与策略10-22
1 材料10-12
2 策略12-22
结果22-35
1 氟化钠、亚砷酸钠对 BRL-3A 细胞形态的影响22-23
2 HE 染色结果23-24
3 氟化钠、亚砷酸钠对大鼠正常肝细胞 BAL-3 A 增殖的影响24-27
4 氟、砷染毒对 BRL-3A 细胞培养上清液中 ALT、AST 活性影响27-28
5 氟、砷染毒对 BRL-3A 细胞氧化应激的影响28-29
6 氟、砷染毒对 BAL-3A 细胞 Bcl-2mRNA 表达水平的影响29-35
讨论35-40
结论40-41
参考文献41-45
文献综述45-54
参考文献52-54
附录54-55
已发表的论文55-56
致谢56