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简述携载黄芪甲苷和阿魏酸静电纺纤维推动血管生成-

最后更新时间:2024-04-13 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:6729 浏览:19172
论文导读:分黄芪甲苷(AT)、当归的主要有效成分阿魏酸(FA),利用电纺纤维携载中药作为组织工程支架,探讨血管相关细胞的增殖和胞外基质分泌,评价推动血管形成和成熟的效果。通过细胞毒性实验筛选AT和FA推动人气静脉内皮细胞(HUVEC)和人脐静脉平滑肌细胞(HUVC)增殖的最佳浓度和比例。当AT和FA的总浓度为

5.0gg/mL,且两者比例为7:3时,能最

摘要:原发性病变及外伤等许多因素都可以导致血液循环不畅或者缺血,此外组织和器官的移植以及构建中也需要血管来输送足够的氧气和营养物质并排除代谢废弃物,否则就会导致组织或器官的坏死,严重威胁人体健康。体外构建的组织植入体内后,氧气和营养物质能否输入是组织存活的关键,这就决定细胞距离最近的血管不得超过200μm。由此体外构建的组织要在植入体内后能存活就必须要有足够的血管生成。静电纺纤维具有比表面积大、孔隙率高、类似细胞外基质(ECM)的结构以及良好的孔道连通性等特点,有利于细胞黏附、铺展生长和组织形成。同时电纺纤维易于携载药物、生物活性物质等,可有效推动组织的修复和再生。临床运用表明中药黄芪和当归均具有行气活血的作用,在推动血管生成相关因子的表达、血管相关细胞的生长和迁移、成熟血管形成等方面显示出独特优势。本论文采取黄芪的主要有效成分黄芪甲苷(AT)、当归的主要有效成分阿魏酸(FA),利用电纺纤维携载中药作为组织工程支架,探讨血管相关细胞的增殖和胞外基质分泌,评价推动血管形成和成熟的效果。通过细胞毒性实验筛选AT和FA推动人气静脉内皮细胞(HUVEC)和人脐静脉平滑肌细胞(HUVC)增殖的最佳浓度和比例。当AT和FA的总浓度为5.0gg/mL,且两者比例为7:3时,能最大限度的推动血管内皮细胞和平滑肌细胞的增殖。通过共混电纺制备得到了携载AT和FA的PELA超细纤维。纤维形貌规整,无液滴和断裂,平均直径约为2μm。体外释放实验表明,两种药物均能在长达4周的时间内持续释放。载0.25%AT和0.5%FA的纤维中20天内累积释放量分别为50.5%和69.1%,与纤维中相应药物含量相比,FA释放稍快。体外细胞评价表明,与空白纤维、浸润自由药物的纤维相比,载药纤维能推动细胞的粘附和增殖,能推动HUVEC分泌粘连蛋白、Ⅳ型胶原、HUVC分泌a肌动蛋白、Ⅰ型胶原,且载药比例为7/3时能推动作用最大。纤维植入大鼠皮下,结果表明各组纤维的降解和炎症反应无显著差别,到第四周时有少量降解碎片、轻度的慢性炎症反应,降解支架周围组的织中有新生血管生成,且随着时间延长,载药纤维组的血管密度会增加。纤维植入皮下推动血管生成方面,与空白纤维、浸润自由药物空白纤维相比,载药纤维推动了血管的生成,且推动成熟血管生成的效果更为显著。在载药纤维中,纤维F7/3的推动效果最佳。论文导读:
关键词:电纺纤维论文黄芪甲苷论文阿魏酸论文组织工程支架论文血管论文
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Abstract7-9
目录9-12
第1章 绪论12-26

1.1 血管及血管组织工程13-16

1.1 血管生成的历程13

1.2 血管构建策略的探讨进展13-14

1.3 血管组织工程的探讨进展14-16

1.2 中药在推动血管生成中的作用16-19

1.2.1 血管生成中中药的作用及探讨进展16-17

1.2.2 黄芪甲苷推动血管生成的作用17-19

1.2.3 阿魏酸推动血管生成的作用19

1.3 静电纺纤维作为组织工程支架19-24

1.3.1 静电纺纤维的特点20-21

1.3.2 静电纺纤维膜作为组织工程支架的探讨进展21-23

1.3.3 载活性物质静电纺纤维作为组织工程支架的探讨进展23-24

1.4 课题的立题作用和探讨内容24-26

1.4.1 本课题的来源24

1.4.2 本课题的探讨目的和作用24

1.4.3 本课题的探讨内容24-25

1.4.4 本课题的革新点25-26

第2章 黄芪甲苷和阿魏酸对内皮细胞和平滑肌细胞增殖的影响26-32

2.1 实验部分26-28

2.

1.1 实验材料26

2.

1.2 细胞的体外培养26-27

2.

1.3 不同浓度和比例的AT/Fa的配制27

2.

1.4 细胞的增殖行为27-28

2.

1.5 统计学浅析28

2.2 实验结果28-30

2.1 不同浓度和比例的AT/FA对HUVEC增殖的影响28-29

2.2 不同浓度和比例的AT/FA对HUVC增殖的影响29-30

2.3 本章小结30-32

第3章 载药纤维的制备及对细胞行为的影响32-45

3.1 实验部分32-36

3.

1.1 实验材料32-33

3.

1.2 载AT/FA静电纺纤维的制备33

3.

1.3 纤维的表征33-34

3.

1.4 纤维的药物体外释放34

3.

1.5 纤维膜的灭菌及细胞接种34-35

3.

1.6 细胞在纤维膜上的生长行为35

3.

1.7 细胞在纤维上胞外基质的分泌35-36

3.

1.8 统计学浅析36

3.2 结果与讨论36-44
3.

2.1 载药纤维的制备36-37

3.

2.2 纤维的药物体外释放37-38

3.2.3论文导读:C在纤维膜上的细胞外基质分泌43-443.3本章小结44-45第4章载药纤维的体内评价45-554.1实验部分45-484.1.1实验材料454.1.2纤维的皮下植入及取样45-474.1.4HE染色474.1.5免疫组化染色474.1.6统计学浅析47-484.2实验结果48-544.2.1纤维的降解48-494.2.2炎症反应49-514.2.3HE染色观察血管的生成51-524.2.5细胞外基
HUVEC在纤维上的生长38-40
3.

2.4 HUVEC在纤维上的胞外基质分泌40-41

3.

2.5 HUVC在纤维膜上的生长41-43

3.

2.6 HUVC在纤维膜上的细胞外基质分泌43-44

3.3 本章小结44-45
第4章 载药纤维的体内评价45-55

4.1 实验部分45-48

4.

1.1 实验材料45

4.

1.2 纤维的皮下植入及取样45-47

4.

1.4 HE染色47

4.

1.5 免疫组化染色47

4.

1.6 统计学浅析47-48

4.2 实验结果48-54
4.

2.1 纤维的降解48-49

4.

2.2 炎症反应49-51

4.

2.3 HE染色观察血管的生成51-52

4.

2.5 细胞外基质的染色、统计处理52-54

4.3 本章小结54-55
全文结论55-57
致谢57-58
攻读硕士期间发表论文58-60
参考文献60-65