瘀、热、毒证治理论,900抗炎宝加味丸,胃癌细胞,多药耐药,效应机制,

论文导读：谷胱甘肽转移酶解毒作用增强；药物靶位点转变,如拓扑异构酶Ⅱ水平降低；细胞凋亡调控,如野生型p53基因的缺乏或突变等。目前,肿瘤多药耐药的逆转主要有三种措施：西药逆转、基因治疗及中药逆转。西药逆转剂由于毒副作用大、疗效不肯定,还不能推广到临床进行大规模运用；基因治疗尚停留在实验室探讨水平,没有临床探讨报道,离临床运
摘要：热邪,瘀血、毒邪三者之间密切相关。热能蕴毒、瘀血蕴久亦可化毒,以而形成热瘀毒交夹的病理情况。由此也增加了疾病的急骤性,缠绵性和疑难性。治疗方面,既要热毒瘀三者并治,又需分清其孰轻孰重、孰先孰后,寻因隶本,抓主要矛盾。热灼津液,津液停留而成痰浊,血行被遏而成瘀血,层层相固,凝聚成块,日以积大,形成癥瘕、肿块、结节等。瘀热毒交结,有形成积聚、癥瘕的病理特点。伤寒论中有着对热邪,瘀血、毒邪三种病邪及其之间密切相关的大量诠释,并运用在疾病的治疗历程中。通过本课题论述探讨发现热邪、瘀血、毒邪三者之间密切相关,瘀热毒交结是形成积聚、癥瘕的重要病机。同时,热邪、瘀血、毒邪与肿瘤病理进程中肿瘤细胞多药耐药病理机制密切相关。此外,本课题进一步探讨了肿瘤细胞多药耐药产生的理由及病理机制。对当前肿瘤多药耐药的治疗近况进行了梳理。肿瘤细胞的耐药性是导致化疗失败的重要因素。多药耐药机制是多方面的,目前己知的肿瘤多药耐药主要机制有药物隔离外排,如P一糖蛋白(P-gp)的高表达；药物代谢,如谷胱甘肽转移酶解毒作用增强；药物靶位点转变,如拓扑异构酶Ⅱ水平降低；细胞凋亡调控,如野生型p53基因的缺乏或突变等。目前,肿瘤多药耐药的逆转主要有三种措施：西药逆转、基因治疗及中药逆转。西药逆转剂由于毒副作用大、疗效不肯定,还不能推广到临床进行大规模运用；基因治疗尚停留在实验室探讨水平,没有临床探讨报道,离临床运用尚有时日；而中药恰好相反,药性缓和,毒副作用小,且较多探讨表明一些中药对化疗具增效减毒作用,因而可能以中药中找到高效低毒的MDR逆转剂。基于此,本课题探讨选取人胃癌普通细胞株SGC7901和耐药细胞株SGC7901/DDP。其中SGC7901/DDP细胞是通过逐量顺铂(DDP)诱导而成,对DDP有较显著的耐受性,能在含0.5mg·L-1顺铂的培养液中持续增殖,且对阿霉素、长春新碱均产生显著耐药,具有显著多药耐药特点。本实验用MTT法测定普通株SGC7901细胞及其耐药株SGC7901/DDP细胞对DDP的敏感性,DDP治疗SGC7901的IC50为0.326mg·L-1, SGC7901/DDP细胞的IC50为1.571mg·L-1,其对DDP的耐受性是SGC7901细胞的4.82倍,表明SGC7901/DDP细胞对DDP有较显著的耐受性,符合耐药细胞株特点,说明本探讨己成功构建多药耐药细胞模论文导读：。当1×10-5g·ml-1KYB与DDP协同作用时,DDP干预SGC7901/DDP细胞的IC50下降为0.374mg·L-1,耐药倍数显著降低,表明KYB可降低耐药细胞SGC7901/DDP的存活率,增加其对DDP的敏感性。且KYB对普通细胞株SGC7901亦有增敏作用,增敏倍数为3.02。为进一步明确KYB实现逆转肿瘤细胞多药耐药的效应机制,本课题探讨着眼于肿瘤多药耐药的关键环节
型。进而经900抗炎宝加味丸干预肿瘤细胞的细胞毒性测定探讨发现,当KYB在培养系统中的浓度为1×10-5·ml-1时,SGC7901及SGC7901/DDP细胞的存活率分别为91.49%和94.26%,即在此剂量时KYB对SGC7901和SGC7901/DDP细胞无显著毒性。由此,确定以1×10-5g·ml-1作为KYB非细胞毒性药物浓度,在此浓度下观察KYB干预胃癌细胞多药耐药的效应及其机制。当1×10-5g·ml-1KYB与DDP协同作用时,DDP干预SGC7901/DDP细胞的IC50下降为0.374mg·L-1,耐药倍数显著降低,表明KYB可降低耐药细胞SGC7901/DDP的存活率,增加其对DDP的敏感性。且KYB对普通细胞株SGC7901亦有增敏作用,增敏倍数为3.02。为进一步明确KYB实现逆转肿瘤细胞多药耐药的效应机制,本课题探讨着眼于肿瘤多药耐药的关键环节P-gp过度表达开展相关探讨。肿瘤多药耐药历程中P-gp过度表达可导致抗肿瘤药物外排增加,使细胞内药物蓄积减少。通过流式细胞仪检测发现,SGC7901细胞内DDP平均荧光强度为1035.71,SGC7901/DDP细胞内DDP荧光强度为327.76,较SGC7901细胞低3.16倍(P0.05)；SGC7901细胞P-gp表达阳性率为10.8l%,SGC7901/DDP细胞P-gp表达阳性率为44.21%,显著高于普通细胞株(P0.01),说明SGC7901/DDP细胞耐药性的产生及细胞内DDP含量的降低与P-gp表达增高所致的细胞内药物隔离外排有关。而探讨中以900抗炎宝加味丸干预后,SGC7901/DDP细胞内DDP荧光强度有干预前的327.76增加为658.79,且SGC7901/DDP细胞P-gp表达由44.21%降低为15.41%,表明KYB确实可显著降低耐药细胞株SGC7901/DDP内P-gp表达,拮抗细胞内抗肿瘤药物DDP的外排。这可能成为900抗炎宝加味丸抗肿瘤历程中实现逆转肿瘤细胞多药耐药的重要效应机制之一。关键词：瘀、热、毒证治论述论文900抗炎宝加味丸论文胃癌细胞论文多药耐药论文效应机制论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。论文导读：实验分组26-271.7细胞培养271.8抗炎宝加味丸干预胃癌细胞存活率测定271.9胃癌细胞耐药指数测定27-281.10抗炎宝加味丸干预后顺铂的耐药逆转指数测定281.11抗炎宝加味丸对细胞内顺铂浓度的影响测定281.12抗炎宝加味丸对细胞内P-gp表达的影响测定281.13统计策略28-292实验结果29-31

2.1抗炎宝加味丸干预胃癌细胞存活率

中文摘要7-9
ABSTRACT9-12
引言12-13
第一章 肿瘤发病机制与瘀、热、毒相关性探讨13-18
第一节 瘀、热、毒与肿瘤13-15
1 瘀、热、毒病理相关13
2 热与毒邪致肿瘤机制13
3 瘀与毒邪致肿瘤机制13-14
4 毒邪致肿瘤机制探讨14-15
第二节 《伤寒论》瘀、热、毒相关证治论述探讨15-18
第二章 清热、化瘀、解毒逆转肿瘤细胞多药耐药的效应机制探讨18-33
第一节 肿瘤多药耐药探讨进展18-24
1 肿瘤细胞MDR机制探讨18-21

1.1 基因编码P糖蛋白(P-gp)转运药物18

1.2 多药耐药相关蛋白(MRP)过度表达18-19

1.3 热休克蛋白(HSPs)滞留化疗药物19

1.4 肺耐药蛋白(LRP)调整药物转运19

1.5 拓扑异构酶Ⅱa(Topo Ⅱa)含量降低19

1.6 核糖体蛋白L2

3、S13(RPL2RPS13)抑制细胞凋亡19-20

1.7 抑癌基因P53的突变20

1.8 凋亡相关蛋白(Bcl-2与Bax)平衡失调20

1.9 膜蛋白Fas/FasL信号传递失调20

1.10 环氧合酶-2(COX-2)过度表达20-21

2 肿瘤细胞MDR逆转探讨进展21-24

2.1 西医药逆转肿瘤细胞MDR探讨进展21

2.2 基因治疗逆转肿瘤细胞MDR探讨进展21-22

2.3 中医药治疗逆转肿瘤细胞MDR机制进展22-24

第二节 抗炎宝加味丸逆转胃癌细胞多药耐药的效应机制探讨24-33
1 实验材料与策略25-29

1.1 细胞株25

1.2 药品与试剂25

1.3 主要溶液配制25-26

1.4 仪器设备26

1.5 药物配制26

1.6 实验分组26-27

1.7 细胞培养27

1.8 抗炎宝加味丸干预胃癌细胞存活率测定27

1.9 胃癌细胞耐药指数测定27-28

1.10 抗炎宝加味丸干预后顺铂的耐药逆转指数测定28

1.11 抗炎宝加味丸对细胞内顺铂浓度的影响测定28

1.12 抗炎宝加味丸对细胞内P-gp表达的影响测定28

1.13 统计策略28-29

2 实验结果29-31

2.1 抗炎宝加味丸干预胃癌细胞存活率测定29

2.2 胃癌细胞耐药指数测定29

2.3 抗炎宝加味丸干预后顺铂的耐药、逆转指数测定29-30

2.4 抗炎宝加味丸对细胞内顺铂浓度的影响测定30-31

2.5 抗炎宝加味丸对细胞内P-gp表达的影响测定31

3 讨论31-33
结论33-34
参考文献34-36
致谢36-37
作者介绍37