探索ETEC 987P基因工程乳酸菌制备及其免疫效果检测

论文导读：林畜牧兽医;、栾金水;乳酸菌的研究应用进展;江苏调味副食品;、曾献春,刘金宝,江岩;番茄、胡萝卜混合汁乳酸菌发酵液对小鼠免疫功能的影响;解放军预防医学杂志;、孔春梅;刘小宝;穆祥;许剑琴;段慧芹-大肠杆菌热稳定肠毒素的攻毒最佳模型的确定;科学技术与工程;【共引文献】中国期刊全文数据库贾莉;刘昱杉;杨严俊-K_(8
ETEC 987P基因工程乳酸菌的制备及其免疫效果的检测论文相关文献崔德凤,张永红;肠毒素型大肠杆菌菌毛的研究进展[J];北京农学院学报;、贺秀媛,李玉峰,王建华;大肠杆菌耐热性肠毒素的研究进展[J];动物医学进展;、张雪寒,何孔旺,张书霞;产肠毒素性大肠杆菌肠毒素的研究概况[J];动物医学进展;、陈祥;高崧;焦新安;刘秀梵-细菌性传染病疫苗研究进展[J];动物医学进展;、王剑虹;江丽君-产肠毒素性大肠杆菌毒力因子与疫苗[J];国外医学(预防、诊断、治疗用生物制品分册);、李春华,梁宏德,杨艳艳,邓瑞广,张改平;K_(88)、K_(99)基因工程菌菌毛抗原的提纯及其检测[J];河南畜牧兽医;1999年04期、刘琼;王春凤-乳酸菌免疫调节功能研究进展[J];吉林畜牧兽医;、栾金水;乳酸菌的研究应用进展[J];江苏调味副食品;、曾献春,刘金宝,江岩;番茄、胡萝卜混合汁乳酸菌发酵液对小鼠免疫功能的影响[J];解放军预防医学杂志;、孔春梅;刘小宝;穆祥;许剑琴;段慧芹-大肠杆菌热稳定肠毒素的攻毒最佳模型的确定[J];科学技术与工程;【共引文献】 中国期刊全文数据库贾莉;刘昱杉;杨严俊-K_(88)-K_(99)-~(987)P和K_(88)-K_(99)-F_(41)佐剂苗对鸡免疫效果的比较[J];安徽农业科学;、褚秀玲;苏建青;韦旭斌-中药抗大肠杆菌病研究进展[J];安徽农业科学;、付仁一;陈陆;王川庆;王家朝-鸿雁致病性大肠杆菌的分离和鉴定[J];安徽农业科学;、董基-杨桃黄瓜复合汁乳酸菌发酵饮料的研制[J];安徽农业科学;、杨欣;吴雅琨;陈丽仙;龙芳羽;王安如-德氏乳杆菌特性及应用研究进展[J];安徽农业科学;、陈亮;蒋文灿-两种消毒剂对规模化鸭场种蛋消毒效果的对比试验[J];现代农业科技;、史素云-大肠杆菌毒力因子研究进展[J];现代农业科技;、冯贤;管妙东-仔猪断奶腹泻大肠杆菌鉴定及其血清型分析[J];现代农业科技;、刘小宝-大肠杆菌肠毒素对微血管内皮细胞功能影响的研究进展[J];保定职业技术学院;、何玲;杨公明-浆水芹菜自然和接种发酵过程中有机酸的变化[J];北方园艺; 前8条 朱明恩-潍坊地区仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定[A];山东农业微生物技术学术研讨会论文集[C];[C];刊全文数据库崔德凤,张永红;肠毒素型大肠杆菌菌毛的研究进展[J];北京农学院学报;、赵红梅;苏加义;赵健-猪源乳酸菌对湖鸭免疫功能的影响[J];长江大学学报(自科版)农学卷;、朱海娟;蔡燕-口服双歧杆菌对极低出生体重儿免疫功能的影响[J];中国当代儿科杂志;、张雪寒,何孔旺,张书霞;产肠毒素性大肠杆菌肠毒素的研究概况[J];动物医学进展;、袁万哲,何孔旺,陆承平,郝勤宗,裘孝良,左玉柱;产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子的研究进展[J];动物医学进展;、何颖;赵武;秦毅斌;赖胜基;胡庭俊;梁保忠;李斌;陈忠伟;胡旭;金锋;孙志勇;韦明宇;张恒博;蓝炳顺-NS复合乳酸菌制剂对断奶仔猪免疫水平的影响[J];动物医学进展;、冯少敏;夏红-特异乳酸菌对机体免疫调节作用的研究[J];临床医学;、王星,覃宗华,刘定发;大肠杆菌不耐热肠毒素的分子生物学及粘膜免疫佐剂效应[J];广东畜牧兽医科技;、阿木尔吉日嘎拉;任贵强;张七斤;张和平;孟和毕力格-两株乳酸菌对鸡新城疫HI抗体效价影响的研究[J];中国畜牧兽医;、徐敬秋;李金波-乳酸菌制剂的免疫赋活作用[J];黑龙江医药;
论文目录
摘要4-5
Abstract5-14
第一章引言14-26

1.1产肠毒素性大肠杆菌的概述及其疫苗的研究进展14-21

1.1产肠毒素大肠杆菌菌毛黏附素的研究进展14-16

1.2肠毒素16-18

1.3ETEC疫苗的研究进展18-21

1.2乳酸菌作为抗原呈递载体的研究进展21-25

1.2.1乳酸菌简介21-22

1.2.2乳酸菌益生功能的研究目前状况22

1.2.3乳酸菌作为外源抗原呈递载体的优越性22-23

1.2.4乳酸菌对机体免疫作用的影响23-24

1.2.5乳酸菌作为口服疫苗呈递载体的应用24-25

1.3研究的目的与作用25-26

第二章重组ETEC987P干酪乳杆菌的构建26-42

2.1材料26-27

2.

1.1质粒和菌株26

2.

1.2主要试剂26

2.

1.3主要仪器设备26-27

2.2策略27-35

2.1重组表达载体pLA-987P的构建27-31

2.2ETEC987P重组干酪乳杆菌表达载体的构建31-32

2.3ETEC987P重组干酪乳杆菌的鉴定32-34

2.4外源蛋白在乳酸菌表面的定位34-35

2.3结果35-39

2.3.1ETEC987P菌毛基因PCR扩增35

2.3.2重组质粒的酶切鉴定结果35-36

2.3.CR扩增干酪乳杆菌转化子的结果36

2.3.4Westernblot蛋白表达检测结果36-37

2.3.5间接免疫荧光法鉴定重组蛋白在乳酸菌表面的表达37-38

2.3.6流式细胞术鉴定外源蛋白在干酪乳杆菌表面的表达38-39

2.4讨论39-41

2.5结论41-42

第三章重组ETEC987P干酪乳杆菌免疫小鼠研究42-56

3.1材料42-43

3.

1.1试验动物42

3.

1.2菌株42

3.

1.3主要试剂42

3.

1.4主要仪器42-43

3.2策略43-48
3.

2.1免疫用重组干酪乳杆菌悬液的制备43

3.

2.2试验动物的分组及免疫43

3.

2.3样本采集43-44

3.

2.4间接ELISA44-45

3.

2.5淋巴细胞的免疫学试验45-46

3.

2.6细胞因子的检测46-47

3.

2.7小鼠攻毒保护性试验47-48

3.3结果48-52

3.1重组蛋白的纯化结果48

3.2血清中ETEC987P特异性IgG效价48-49

3.3粪便中抗987P特异性sIgA效价的测定49

3.4小肠冲洗液和气管冲洗液中特异性sIgA效价的测定49-50

3.3论文导读：俊;王颖;张菲;刘晔;扈荣良-狂犬病病毒糖蛋白基因重组逆转录病毒的构建及其免疫效果;中国生物制品学杂志;、孙家明,李明珠,袁国平,陈美英;国产流行性腮腺炎疫苗和MMR-Ⅱ的免疫效果比较;职业与健康;、林平;狂犬疫苗免疫后血清抗体的检测结果;现代预防医学;、范秀媛,孔德清,张茂金;重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)及其应用;中国
.5血清中IgG抗体亚类的检测结果50

3.6淋巴细胞增殖实验50-51

3.7细胞因子的检测结果51

3.8小鼠的攻毒保护结果51-52

3.4讨论52-55

3.5结论55-56

参考文献56-66
致谢66-68
个人简历68
产肠毒属性大肠杆菌987P菌毛蛋白干酪乳杆菌黏膜免疫
参考文献
刘淑杰;大肠杆菌粘附素亚基FaeG在Lactococcus lactis中的表达及免疫原性研究[D];江南大学;刊全文数据库崔德凤,张永红;肠毒素型大肠杆菌菌毛的研究进展[J];北京农学院学报;、赵红梅;苏加义;赵健-猪源乳酸菌对湖鸭免疫功能的影响[J];长江大学学报(自科版)农学卷;、朱海娟;蔡燕-口服双歧杆菌对极低出生体重儿免疫功能的影响[J];中国当代儿科杂志;、张雪寒,何孔旺,张书霞;产肠毒素性大肠杆菌肠毒素的研究概况[J];动物医学进展;、袁万哲,何孔旺,陆承平,郝勤宗,裘孝良,左玉柱;产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子的研究进展[J];动物医学进展;、何颖;赵武;秦毅斌;赖胜基;胡庭俊;梁保忠;李斌;陈忠伟;胡旭;金锋;孙志勇;韦明宇;张恒博;蓝炳顺-NS复合乳酸菌制剂对断奶仔猪免疫水平的影响[J];动物医学进展;、冯少敏;夏红-特异乳酸菌对机体免疫调节作用的研究[J];临床医学;、王星,覃宗华,刘定发;大肠杆菌不耐热肠毒素的分子生物学及粘膜免疫佐剂效应[J];广东畜牧兽医科技;、阿木尔吉日嘎拉;任贵强;张七斤;张和平;孟和毕力格-两株乳酸菌对鸡新城疫HI抗体效价影响的研究[J];中国畜牧兽医;、徐敬秋;李金波-乳酸菌制剂的免疫赋活作用[J];黑龙江医药; 中国重要报纸全文数据库前1条 本报记者 张嶷;[N];中国食品报;刊全文数据库郑冬梅,高云航,王冲,陈红,何昭阳;雏鸡新城疫滴鼻免疫后各黏膜免疫应答点的免疫效果监测[J];中国兽医杂志;、赵娜;张守峰;胡永浩;包世俊;王颖;张菲;刘晔;扈荣良-狂犬病病毒糖蛋白基因重组逆转录病毒的构建及其免疫效果[J];中国生物制品学杂志;、孙家明,李明珠,袁国平,陈美英;国产流行性腮腺炎疫苗和MMR-Ⅱ的免疫效果比较[J];职业与健康;、林平;狂犬疫苗免疫后血清抗体的检测结果[J];现代预防医学;、范秀媛,孔德清,张茂金;重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)及其应用[J];中国计划免疫;、武志强;于文涛;陈建荣;林嘉凯;罗阳兴-黄羽肉鸡大肠杆菌的分离鉴定和多价灭活苗的免疫效果[J];福建农林大学学报(自然科学版);、潘赛贻,周洁娴,黄健康;华支睾吸虫可溶性抗原对BALB/C鼠免疫效果的研究[J];广东卫生防疫;1998年03期、甘慧泉,吴忠道;黏膜免疫及其在疫苗研制中的应用[J];热带医学杂志;、刘蕊娜;邹年莉;王红宁;柳萍;黄勇-鸡IL-6真核表达载体的构建及其对新城疫LaSota疫苗的免疫增强作用研究[J];畜牧兽医学报;、蒋万春;赵德明-猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白-重组犬1型腺病毒构建及在猪体内免疫特性[J];中国兽医学报; 杨晨涛;马翠卿;姚智燕;魏林-IL-23对A组链球菌表面蛋白Fba蛋白所诱发的免疫效果的影响[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];、赵卓;潘延钵;邓玉芹;张海玲;袁立伟;黄艳杰-新型纳米佐剂用于猪伪狂犬灭活疫苗免疫效果研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集（、林绮萍;唐秀英;陈瑞爱;朱文冠;黄文科;李琳;刘成宏-不同厂家生产的鸡传染性支气管炎三联灭活疫苗免疫效果比较[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];、曹国文;陈春林;刘莉娟-中药芦荟多糖佐剂对灭活菌苗免疫效果的影响[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];、吴晓娟;冷梅-CpG对乙肝核酸疫苗及基因重组(CHO细胞)疫苗免疫效果的影响[A];、张辉;焦新安;潘志明;胡茂志;唐丽华-重组沙门菌口服免疫诱导的免疫应答动态分析[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];、陈汉忠;罗秀帧;谢婷;姚玲;郭直;孙坚;欧阳康;韦晓宝-微囊型鸡球虫疫苗不同免疫剂量免疫效果的初步研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];、郭斐;陆柔剑;孙朝晖;阮力-非复制重组痘苗病毒表达的细胞因子(IL-5、IL-6)可增强重组病毒的免疫效果[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];、陆芹章;吴健敏-猪瘟牛睾丸细胞苗与兔体组织苗免疫效果的比较观察[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立庆典暨第十次学术研讨会论文集（上）[C];、梁华丽;顾亚仙;华炯钢;徐辉-四种鸡新城疫油佐剂灭能苗免疫效果的比较试验[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C]; 中国重要报纸全文数据库;科学家首次获得具有免疫效果的艾滋病疫苗[N];新华每日电讯;、山东省畜牧兽医职业学院温大伟孔令凯;鸡法氏囊病流行新特点与防控措施（上）[N];江苏农业科技报;、刘铭;肉鸡免疫中存在的理由[N];中国畜牧兽医报;、徐斌;动物疫病春防工作展开[N];盘锦日报;、江苏省农业科学院吕立新;影响兽用生物制品免疫效果的因素分析[N];中国畜牧报;、吉林省大安市龙沼镇农技服务站畜牧组洪学;鸡群免疫新法——嘴眼鼻闷法[N];河北科技报;、洪学;正确稀释禽疫苗[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;、;仔猪猪瘟超前免疫[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;、北京华都种猪繁育有限责任公司王林锋;猪场预防免疫的注意要点[N];中国畜牧兽医报;、王林锋;猪场预防免疫注意要点[N]论文导读：
;陕西科技报; 中国博士学位论文全文数据库高云航;猪瘟超前免疫效果综合评价[D];吉林农业大学;、许国晶;牙鲆免疫应答的温度效应及黏膜免疫分子的研究[D];中国海洋大学;、陈鸿鹄;肠道派氏结嗜酸性粒细胞亚群的发现及其黏膜免疫调控功能与机制的研究[D];浙江大学;、丛华;弓形虫多价和多表位核酸疫苗黏膜免疫的实验研究[D];山东大学;、魏双施;重组鹅IL-17对鹅细小病毒VP3黏膜免疫增强作用的研究[D];东北农业大学;、曹永生;Asia1型FMDV复合表位免疫原的研制及免疫效果研究[D];东北农业大学;、曹永生;Asial型FMDV复合表位免疫原的研制及免疫效果研究[D];东北农业大学;、马海利;O型FMDV复合表位/CTB重组枯草芽孢杆菌构建与实验免疫[D];吉林大学;、李海;酶联免疫斑点法快速诊断活动性结核病的临床应用研究[D];广西医科大学;、肖诚;雷公藤对CIA模型肠道黏膜免疫的影响[D];中国中医研究院; 中国硕士学位论文全文数据库齐浩;ETEC 987P基因工程乳酸菌的制备及其免疫效果的检测[D];黑龙江八一农垦大学;、王吉玮;口蹄疫干粉制剂对动物鼻黏膜免疫效果研究[D];中国农业科学院;、孙景秀;NDV HN蛋白重组乳酸菌的免疫学研究[D];黑龙江八一农垦大学;、柴方红;猪附红细胞体对仔猪免疫水平的影响[D];延边大学;、蔡岩;无铝佐剂人用狂犬病疫苗（Vero细胞）免疫效果的研究[D];吉林大学;、邱俊;单纯疱疹病毒I型糖蛋白B基因疫苗免疫效果的初步研究[D];吉林大学;、黄梅清;禽（番鸭）呼肠孤病毒感染油乳剂灭活苗的制备和免疫效果的研究[D];福建农林大学;、郝慧芳;细粒棘球蚴内蒙株核酸疫苗构建及在真核细胞中的表达[D];内蒙古大学;、刘岩松;毕赤酵母表达乙型肝炎病毒preS2S蛋白的纯化和免疫效果[D];吉林大学;、武泽轩;抗金葡萄球菌奶牛乳腺炎疫苗的研制[D];东北农业大学;