试议转氨酶ATA117在大肠杆菌中高效重组表达及催化制备西他列汀

论文导读：、杨琳琳;鲍宝龙-斑点叉尾鮰CC趋化因子SCYA117的重组表达;中国鱼类学会、吕敏娜;覃宗华;袁建丰;孙铭飞;余劲术;吴彩艳;蔡建平-鸭疫里默氏杆菌甲羟戊酸激酶基因的序列分析与重组表达;中国畜牧兽医学会会论文集（下册）;、李坤;倪崖;徐万祥;宋力雯;姚康寿;张欣宗;黄荷凤;张艳铃;石其贤-大肠杆菌重组表达的人卵透明带3肽段的
转氨酶ATA117在大肠杆菌中的高效重组表达及催化制备西他列汀论文相关文献前2条郭跃平;应向贤;赵冉冉;汪钊-酶法制备手性芳香胺化合物的研究进展[J];化工进展;、贾红华;朱清禾;李艳;马莹莹;贾黎莎;韦萍-ω-转氨酶制备手性胺的研究进展[J];现代化工;【共引文献】 中国期刊全文数据库吴小飞;刘均洪-生物转化中新酶应用研究的最新进展[J];安徽化工;、;李宗伟;闫世梁;丁晓兵;秦广雍-溶氧制约对氨基酸发酵的影响[J];安徽农业科学;、玉琼广;冯琳;陈江枫;梁露锋;胡华宇-机械活化玉米淀粉免液化快速糖化的研究[J];安徽农业科学;、孔晶;贾建波;赵玉萍;任世英-rhtB基因过表达苏氨酸工程菌发酵过程的优化制约[J];安徽农业科学;、吴健全;郭长江;徐琪寿-色氨酸操纵子研究进展[J];氨基酸和生物资源;、单天宇;王栋;徐岩;何军邀-华根霉菌丝体结合脂肪酶催化酯合成动力学拆分2-辛醇[J];催化学报;、徐礼生;刘均忠;王治元;张宏娟;刘伟;刘茜;焦庆才-水/有机溶剂双相体系中色氨酸合成酶酶法合成L-色氨酸[J];催化学报;、柳春红;王伟华;孙远明;林峰;张明明-壬基酚和辛基酚联合染毒的尿液代谢组学研究[J];分析化学;、胡华宇;黄祖强;袁建微;童张法-双酶协同作用机械活化玉米淀粉的水解规律[J];广西大学学报(自然科学版);、平丽英;柳志强;薛亚平;郑裕国-酶的分子定向进化及其应用[J];基因组学与应用生物学; 前2条 粟桂娇;陈敏;莫祺红;李伟光;刘雄民-茴脑深加工制取茴香醛及茴香醛生物合成研究[A];第四届全国工业催化技术及应用年会论文集[C];刊全文数据库前4条杨鳌,张雅薇,李坤宇,关烨第;光活性酮咯酸衍生物的合成与拆分[J];北京大学学报(自然科学版);、郭跃平;应向贤;赵冉冉;汪钊-酶法制备手性芳香胺化合物的研究进展[J];化工进展;、徐刚;戴军强;吴坚平;杨立荣-有机相中酶催化1-乙胺的不对称酰胺化反应[J];化工学报;、许良葵;林华庆;张蜀-新手性药物左旋沙丁胺醇的研究进展[J];中南药学;【相似文献】 中国期刊全文数据库杨宁;蓝东明;王永华;杨博-白假丝酵母脂肪酶CaLIP5在毕赤酵母X33中的优化重组表达[J];安徽农业科学;、陈丹;袁宁;胡又佳;朱春宝;赵文杰;朱宝泉-顶头孢霉乙酰转移酶基因的克隆、表达和活性研究[J];中国抗生素杂志;、李飞;李迅;孙静;王飞;赵林果-木聚糖酶基因xynB在不同大肠杆菌表达系统中的表达比较[J];应用与环境生物学报;、宋柬;勤;郝佳;任发政;陈尚武-大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定[J];食品科学;、周宇荀,曹巍,魏东芝,罗清平,王锦之;抗菌肽Adenoregulin基因工程菌培养条件的优化及分批发酵研究[J];生物工程学报;、陈静;孙红颖;陈枢青-纳升电喷雾串联质谱鉴定重组人素(1-34)[J];分析化学;、凌医生-转氨酶增高需查丙肝[J];家庭科技;、相丽新;曹健;王红军;尹艳丽;王育军;于海东;张琳;董理-植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达[J];化学与生物工程;、高雯;用于鉴别有活性和对映体选择性的v-转氨酶的策略[J];中国医药工业杂志;、张晓;吴海珍;卫玮;徐红艳;张元兴-大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因的克隆、表达及功能研究[J];食品与药品; 高心;庚华;钟丞;何钟勤-殊异韦荣菌乳酸脱氢酶的基因克隆及重组表达[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];、岳欣;刘保忠-一种文蛤溶菌酶基因的克隆、重组表达与抑菌活性分析[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];、杨保胜;张继红;王天云;王文峰-人血管内皮生长因子基因的克隆及在CHO细胞中重组表达[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];、段德义;杨慧;徐群渊;刘玉军;张进禄-GST-GDNF融合蛋白在大肠杆菌中的重组表达[A];解剖学杂志——中国解剖学会年会文摘汇编[C];、倪敏;易维京;张竹君;张阳;陈莎;胡川闽;李淑慧-功能性重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF)的研究[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];、王尊;冯红-短小芽胞杆菌双组分信号DegS/DegU蛋白的重组表达与生化特性[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];、杨琳琳;鲍宝龙-斑点叉尾鮰CC趋化因子SCYA117的重组表达[A];中国鱼类学会、吕敏娜;覃宗华;袁建丰;孙铭飞;余劲术;吴彩艳;蔡建平-鸭疫里默氏杆菌甲羟戊酸激酶基因的序列分析与重组表达[A];中国畜牧兽医学会会论文集（下册）[C];、李坤;倪崖;徐万祥;宋力雯;姚康寿;张欣宗;黄荷凤;张艳铃;石其贤-大肠杆菌重组表达的人卵透明带3肽段的功能评价[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];、熊丽;周勇志;王欣之;张厚双;周金林-伊氏锥虫ShTat12VSG的重组表达及其在诊断上的潜力[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];
论文目录
致谢5-6
摘要6-7
Abstract7-12
第一章文献综述12-28

1.1生物催化制备手性胺12-16

1.1外消旋胺的动力学拆分(KR)12-14

1.2胺的动态动力学拆分(DKR)14-15

1.3转氨酶不对称合成手性胺15-16

1.2转氨酶简介16-22

1.2.1转氨酶的分类17-19

1.2.2转氨酶的催化机制19

1.2.3ω-转氨酶的应用19-22

1.3西他列汀22-26

1.3.1西他列汀的化学名称及结构23

1.3.2西他列汀的药理作用23-论文导读：和EDTA对转氨酶活力的影响55-563.3.6转氨酶ATA117全细胞酶活和粗酶液酶活的比较56-573.4本章小结57-58第4章重组工程菌的发酵工艺研究58-794.1引言584.2材料和策略58-604.2.1实验材料58-594.2.2培养基594.2.3培养策略594.2.4分析策略59-604.3实验结果和讨论60-774.3.1单因素优化培养基60-634.3.2二水平因子设计法筛选产酶的重
24

1.3.3西他列汀的合成24-26

1.4本课题的研究思路与主要内容26-28

第二章转氨酶基因的克隆和重组表达28-50

2.1引言28

2.2材料与策略28-43

2.1菌种与质粒28-31

2.2实验仪器31-33

2.3药品与试剂33-35

2.4实验策略35-41

2.5分析策略41-43

2.3实验结果与讨论43-48

2.3.1PCR获取基因43-44

2.3.2目的基因和四种质粒的双酶切44-45

2.3.3重组质粒的构建及验证45-46

2.3.4四种重组质粒的蛋白表达情况46-47

2.3.5重组菌活力的验证47-48

2.4本章小结48-50

第3章重组转氨酶的酶学性质研究50-58

3.1引言50

3.2材料与策略50-52

3.

2.1实验仪器50

3.

2.2实验药品50-51

3.

2.3重组大肠杆菌发酵培养及产酶51

3.

2.4重组转氨酶ATA117的酶学性质研究51-52

3.3结果与讨论52-57

3.1转氨酶的最适pH52

3.2酶的酸碱稳定性52-54

3.3转氨酶的最适温度54

3.4酶的热稳定性54-55

3.5金属离子和EDTA对转氨酶活力的影响55-56

3.6转氨酶ATA117全细胞酶活和粗酶液酶活的比较56-57

3.4本章小结57-58

第4章重组工程菌的发酵工艺研究58-79

4.1引言58

4.2材料和策略58-60

4.

2.1实验材料58-59

4.

2.2培养基59

4.

2.3培养策略59

4.

2.4分析策略59-60

4.3实验结果和讨论60-77
4.

3.1单因素优化培养基60-63

4.

3.2二水平因子设计法筛选产酶的重要因素63-64

4.

3.3最陡爬坡实验(steepestascentdesign)64-65

4.

3.4中心组和设计和响应面法确定培养基组分的浓度65-69

4.

3.5最适诱导条件的确定69-73

4.

3.6高密度发酵工艺研究73-77

4.4本章小结77-79
第五章重组转氨酶催化制备西他列汀的工艺研究79-89

5.1引言79

5.2材料和策略79-80

5.

2.1实验材料79

5.

2.2催化剂的制备79-80

5.

2.3分析策略80

5.3结果与讨论80-87
5.

3.1助溶剂种类的选择80-81

5.

3.2DMSO浓度的选择81-82

5.

3.3细胞负载量的考察82

5.

3.4辅酶浓度的优化82-83

5.

3.5底物浓度的考察83-84

5.

3.6产品的分离与纯化84-85

5.

3.7产品的鉴定85-87

5.4本章小结87-89
第六章结论与展望89-91

6.1结论89-90

6.2展望90-91

参考文献91-96
附录96-97
作者简介97
转氨酶重组表达响应面优化西他列汀
参考文献
阎金勇;白地霉脂肪酶的制备、修饰改良及应用研究[D];华中科技大学;刊全文数据库前4条杨鳌,张雅薇,李坤宇,关烨第;光活性酮咯酸衍生物的合成与拆分[J];北京大学学报(自然科学版);、郭跃平;应向贤;赵冉冉;汪钊-酶法制备手性芳香胺化合物的研究进展[J];化工进展;、徐刚;戴军强;吴坚平;杨立荣-有机相中酶催化1-乙胺的不对称酰胺化反应[J];化工学报;、许良葵;林华庆;张蜀-新手性药物左旋沙丁胺醇的研究进展[J];中南药学;【相似文献】 中国期刊全文数据库杨宁;蓝东明;王永华;杨博-白假丝酵母脂肪酶CaLIP5在毕赤酵母X33中的优化重组表达[J];安徽农业科学;、陈丹;袁宁;胡又佳;朱春宝;赵文杰;朱宝泉-顶头孢霉乙酰转移酶基因的克隆、表达和活性研究[J];中国抗生素杂志;、李飞;李迅;孙静;王飞;赵林果-木聚糖酶基因xynB在不同大肠杆菌表达系统中的表达比较[J];应用与环境生物学报;、宋柬;勤;郝佳;任发政;陈尚武-大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定[J];食品科学;、周宇荀,曹巍,魏东芝,罗清平,王锦之;抗菌肽Adenoregulin基因工程菌培养条件的优化及分批发酵研究[J];生物工程学报;、陈静;孙红颖;陈枢青-纳升电喷雾串联质谱鉴定重组人素(1-34)[J];分析化学;、凌医生-转氨酶增高需查丙肝[J];家庭科技;、相丽新;曹健;王红军;尹艳丽;王育军;于海东;张琳;董理-植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达[J];化学与生物工程;、高雯;用于鉴别有活性和对映体选择性的v-转氨酶的策略[J];中国医药工业杂志;、张晓;吴海珍;卫玮;徐红艳;张元兴-大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因的克隆、表达及功能研究[J];食品与药品; 高心;庚华;钟丞;何钟勤-殊异韦荣菌乳酸脱氢酶的基因克隆及重组表达[A];全国第三次牙体牙髓病学临床技术研讨会论文汇编[C];、岳欣;刘保忠-一种文蛤溶菌酶基因的克隆、重组表达与抑菌活性分析[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];、杨保胜;张继红;王天云;王文峰-人血管内皮生长因子基因的克隆及在CHO细胞中重组表达[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];、段德义;杨慧;徐群渊;刘玉军;张进禄-GST-GDNF融合蛋白在大肠杆菌中的重组表达[A];解剖学杂志——中国解剖学会年会文摘汇编[C];、倪敏;易维京;张竹君;张阳;陈莎;胡川闽;李淑慧-功能性重组人巨噬细胞移动抑制因子(hMIF)的研究[A];第十届全国抗炎免疫药理学学术会议论文集[C];、王尊;冯红-短小芽胞杆菌双组分信号DegS/DegU蛋白的重组表达与生化特性[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];、杨琳琳;鲍宝龙-斑点叉尾鮰CC趋化因子SCYA117的重组表达[A];中国鱼类学会、吕敏娜;覃宗华;袁建丰;孙铭飞;余劲术;吴彩艳;蔡建平-鸭疫里默氏杆菌甲羟戊酸激酶基因的序列分析与重组表达[A];中国畜牧兽医论文导读：
学会会论文集（下册）[C];、李坤;倪崖;徐万祥;宋力雯;姚康寿;张欣宗;黄荷凤;张艳铃;石其贤-大肠杆菌重组表达的人卵透明带3肽段的功能评价[A];第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会论文汇编[C];、熊丽;周勇志;王欣之;张厚双;周金林-伊氏锥虫ShTat12VSG的重组表达及其在诊断上的潜力[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C]; 中国重要报纸全文数据库洪秀;可降低转氨酶的中药制剂[N];大众卫生报;、开文;服用他汀出现转氨酶增高怎么办[N];大众卫生报;、魏开敏;服用他汀出现转氨酶增高怎么办？[N];中国中医药报;、吕国梁;可降低转氨酶的中药制剂[N];中国医药报;、赵荣立;可降低转氨酶的中药制剂[N];中国中医药报;、江苏省盐城市115信箱副主任医师吕国梁;可降低转氨酶的中药制剂[N];民族医药报;、岳金凤;转氨酶偏高和喝汤药有关吗？[N];健康时报;、王振坤;乙肝带毒者转氨酶升高理由多[N];健康报;、主治医师 王小衡;转氨酶增高需查丙肝[N];卫生与生活报;、宋海云;中药降转氨酶要分寒热虚实[N];大众卫生报; 中国博士学位论文全文数据库段绪果;淀粉脱支酶的重组表达及分子改造[D];江南大学;、姜珊;两种水产动物抗菌肽的重组表达工艺优化与药理药效研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;、梁永利;家蝇抗菌肽基因的表达模式与重组表达[D];山东大学;、魏洪涛;人β_2防御素的重组表达、纯化与活性分析及其mRNA在牙龈上皮的表达[D];吉林大学;、林伟;家蚕质多角体病毒主要衣壳蛋白的鉴定及定位研究[D];中山大学;、娄加陶;结核杆菌抗原CD8+ T细胞多表位“串珠式”肽疫苗研究[D];第二军医大学;、李柏志;蛋白酶缺陷型毕赤酵母重组表达人血白蛋白中试发酵工艺的研究[D];吉林大学;、沈永才;人蛋白C的研制及其相关研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;、张继泉;中国明对虾免疫等相关基因的克隆、重组表达与功能分析[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;、李成华;栉孔扇贝核心组蛋白的基因结构及H2A抗菌活性的研究[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）; 中国硕士学位论文全文数据库王璐;转氨酶ATA117在大肠杆菌中的高效重组表达及催化制备西他列汀[D];浙江大学;、顾玮彦;重组大肠杆菌生产肠激酶的研究[D];浙江大学;、薛剑峰;对虾素CHP3和CHP5的原核与真核重组表达及性质研究[D];山东大学;、谢红梅;鸡传染性支气管炎S1基因在大肠杆菌中的表达及其生物活性的初步鉴定[D];山东农业大学;、卜兴江;中国对虾组织蛋白酶L和溶菌酶的重组表达及性质研究[D];山东大学;、迟磊;牛副结核病多重组抗原间接ELISA策略的建立及应用[D];吉林农业大学;、董杜鹃;棉铃虫组织蛋白酶B及前导肽的重组表达及性质研究[D];山东大学;、朱函坪;汉坦病毒N蛋白的重组表达及其IgM直接捕捉ELISA的建立和应用[D];浙江大学;、金凤;AccRoyalisin重组表达及产物抑菌活性研究[D];浙江大学;、庾桦;殊异韦荣菌乳酸脱氢酶的基因克隆及重组表达[D];吉林大学;