试述动物遗传学教学实验“小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作”方法改善

论文导读：效果。关键词动物遗传学睾丸细胞减数分裂染色体改善：AAnimalGeneticsTeachingExperiment"MouseTestisMeioticChromosomeSpecimen"MethodsImprovementZHANGYanjun，LAIShuangying，SURui，ZHANGWenguang（CollegeofAnimalScience，InnerMongoliaAgriculturalUniversity，Hohh
摘 要 “减数分裂期染色体制备实验”是动物遗传学实验课程重要内容。本文介绍了小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作的改善策略，通过本策略可制备和观察到大量分散良好、背景清晰、染色体结构紧凑的睾丸细胞减数分裂各期分裂相，得到较好的实验效果。
关键词 动物遗传学 睾丸细胞 减数分裂 染色体 改善
：A
Animal Genetics Teaching Experiment "Mouse Testis Meiotic
Chromosome Specimen" Methods Improvement
ZHANG Yanjun， LAI Shuangying， SU Rui， ZHANG Wenguang
（College of Animal Science， Inner Mongolia Agricultural University， Hohhot， Inner Mongolia 010018）
Abstract "Preparation of meiotic chromosomes experiment" is an important part of animal genetics experiment course. This article describes the mouse testis meiotic chromosome specimen of the improved method， can be prepared by this method and observed a large number of well-dispersed， clear background， compact testicular meiotic chromosome structure of each phase of the division， get better experimental results.
Key words animal genetics； testicular cells； meiosis； chromosome； improvement
遗传学既是一门历史悠久的学科，又是一门发展迅速、实践性很强的学科，研究范围正在不断拓宽和深化，新技术、新策略不断涌现。动物遗传学作为遗传学的一个分支，是畜牧兽医学科的基础课程。动物遗传学实验课是配合动物遗传学理论教学而设置的，通过实验课的教学，力求使同学们能够对动物遗传学的基本理论和概念有更加深刻的认识，在实验过程中培养同学们观察理由、分析理由和解决理由的能力，同时也锻炼了学生的实际操作能力。
减数分裂是等位基因的分离和非等位基因的自由组合的细胞学基础。在教学中，要让学生理解和掌握细胞的减数分裂，就必须借助较好的实验课，实验结果的效果将直接影响学生对理论基础的理解和掌握。“细胞减数分裂期染色体制备实验”是动物遗传学实验课程重要内容，一些遗传学教学人员在该实验策略上进行了一些摸索，也取得了一定的效果。①②③④⑤近年来，内蒙古农业大学“家畜遗传繁育系列课程国家教学团队”动物遗传学课程教学人员结合动物遗传学实验课教学和其他研究人员的研究成果，对小鼠睾丸组织细胞减数分裂期染色体标本制作实验策略的进行了摸索、改善，建立了一种有效的制备策略，可清晰地观察到减数分裂各个时期细胞核与染色质的变化，获得较理想的效果。下面对该实验的操作过程和实验结果介绍如下，供遗传学实验教学人员参考。
1 材料和策略

1.1 材料

性成熟的雄性小鼠。
秋水仙素水溶液（1mg/ml），0.45%柠檬酸钠溶液，5% 8-羟基喹啉，0.075M KCL溶液。
固定液：甲醇、氯仿、冰醋酸6：3：1比例混合，卡诺固定液：甲醇、冰醋酸以3：1混合，Giemsa染液。

1.2 策略

（1）摘出睾丸：选取健康的，性成熟的雄性小鼠，于腹腔内注射秋水仙素（约3 g/g体重）。注射之后2h左右，将鼠引颈处死，腹面向上放在纸上，用70%酒精棉球从下腹部开始，向上将体毛分开。用手术剪剪开腹部皮，然后用两只镊子剥离皮肤，取出睾丸。在玻璃平皿中加入4ml 0.45%柠檬酸钠与0.075MKCL溶液1：1混合液中，再加入0.15ml秋水仙素。将睾丸移入平皿。
（2）取精细管：剔除脂肪后，迅速剥开睾丸被膜，然后将精细管稍加洗涤，放于另一事先准备好的有5ml 0.45%柠檬酸钠与0.075MKCL溶液1：1混合液的玻璃平皿中。用剪刀迅速将精细管剪成小段，剪得愈细碎愈好，然后一边搅动一边轻压材料，使精细管内的细胞游离于液体中。将混合液移入离心管中，以800rpm 离心5min，弃去上清液。
（3）低渗处理：补加低渗液至5ml， 37℃低渗处理30分钟。
（4）细胞固定：在上述低渗液中，加入几滴5% 8-羟基喹啉进行整体固定，以800rpm 离心5min，弃去上清液。加入固定液（甲醇：氯仿：冰醋酸为6：3：1）处理20分钟。900rpm离心10min， 弃上清。加入新配制的卡诺固定液重复固定1次。
（5）分散细胞：吸弃上清液，加入5ml的60%乙酸，轻轻摇动2分钟（使细精管上的细胞游离下来，以便得到细胞悬液），300rpm，离心5min。取上液移入另一5ml离心管内，1000rpm离心10min，弃上清液。
（6）滴片：在沉淀物上加0.5ml的固定液制备细胞悬液，适当高度滴在已用冰水预冷的清洁载玻片上，吹干或用微火烤干。
（7）染色：用Giemsa原液与9份磷酸缓冲液染色20分钟，用流水冲洗，晾干或用吹风机吹干。
（8）观察：将制备好的标本可以直接进行观察，亦可加上盖玻片封固后进行观察。 全文地址：www.7ctime.com/ktjxlw/lw26301.html上一论文：谈述谈如何提高历史教学的趣味性