试述颠茄ODC基因克隆和功能

论文导读：.6.3目的条带的回收21-223.6.4目的片段与克隆载体T连接223.6.5大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaCl2法)223.6.6连接反应物转化大肠杆菌感受态细胞22-233.7AbODC基因cDNA的克隆与分析23-313.7.1从颠茄总RNA合成第一链cDNA233.7.2目的基因的克隆23-283.7.3AbODC基因的生物信息学分析28-293.7.4颠茄AbODC基因组DNA及启动子序列的
颠茄ODC基因克隆和功能论文相关文献黄小均,石大兴,王米力,陈桂兰;水培广东万年青光合日变化研究[J];安徽农业科学;、邹毅;杨建华;陈尚鐦-一类优良球根花卉石蒜的简述[J];安徽农业科学;、李勇冠;慕小倩-附子光合特性研究[J];安徽农业科学;、王爱云;赵彦宏;张萍;刘林德;王丽娟;张琳丰-烟台绵枣儿的核型研究[J];安徽农业科学;、赵权;赵文若-遮阴处理对大叶芹品质的影响[J];安徽农业科学;、聂谷华;汪小飞;刘志金;廖亮;徐玲玲-禺毛茛居群地理变异研究[J];安徽农业科学;、杨相甫;李发启;师学珍;王太霞-河南种子植物区系增补[J];安徽农业科学;、王伟;黄为昌;金荷仙;陈香波-观赏石斛兰研究进展[J];安徽农业科学;、王振军;郝晓鹏;郭东罡;上官铁梁-山西黑茶山自然保护区青毛杨的濒危理由和保护策略[J];安徽农业科学;、王代谷;邓克云;魏春杰-贵州兜兰属植物的目前状况及展望[J];安徽农业科学; 杨占辉;史言妍;高亦珂-有髯鸢尾杂交育种研究[A];中国观赏园艺研究进展胡椒中胡椒碱的含量[A];“亚运食品安全与广东食品产业创新发展”学术研讨会暨刊全文数据库何子双;胡元亮;印遇龙;黄瑞林;李飞务;王贵平-甘草次酸对早期断奶仔猪内脏器官发育的影响[J];畜牧兽医学报;、于永生;罗晓彤;金海国;赵越超-多胺代谢相关基因在小鼠子宫内膜细胞中的调节[J];中国农业大学学报;、张翥;董国忠;张文火;韩洪英-断奶仔猪饲粮中添加腐胺的营养生理效应研究[J];中国畜牧杂志;、刘华山,朱大恒,韩锦峰,毕庆文,曾涛;外源植物生长调节物质对烟草根中烟碱含量和烟碱合成酶活性变化的生理效应[J];植物生理学通讯;、张文学;王新霞;李彬;郭玉广-一例樱桃谷雏鸭大肠杆菌病的诊断[J];中国动物检疫;、王秋生-一例乌骨白痢沙门氏菌感染的诊治[J];畜禽业;、穆杨;张彦明;王华;石兴武;高巨星;赵毅-牦牛巴氏杆菌病的诊断报告[J];中国兽医杂志;、徐尚荣-大肠杆菌O157∶H7的生物学特性[J];青海畜牧兽医杂志;、李金钟-与人类和动物感染相关的4个非发酵菌新菌属[J];中国微生态学杂志;、胡利华;闫茂仓;陈少波;单乐州;马爱敏;谢起浪-条石鲷出血病病原的分离与鉴定[J];水产养殖; 前7条 刘贤锡;胡海燕;刘师莲;迟伟玲-鸟氨酸脱羧酶基因表达与良性前列腺增生症相关性研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];、王儒鹏;张国威;何云志;黄海-芳维A酸乙酯对小鼠皮肤状瘤形成过程中ODC、PCNA的影响[A];中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];、崔树玉;孙启华;孟蔚;温宪芹;周国清;毕振强-山东省O_(157)大肠杆菌动物宿主带菌情况调查[A];新世纪预防医学面对的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];、王洲;陈蔚文;李茹柳;文彬;孙景波-胃泌素推动大鼠小肠上皮细胞系的分化[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];、王洲;陈蔚文;李茹柳;文彬;孙景波-胃泌素推动大鼠小肠上皮细胞系的分化[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集（第一部分）[C];、张岩;刘贤锡;胡海燕;刘师莲;刘传华;王伟;张冰;孙爱华;姜广水-人ODC基因反义RNA腺病毒载体的构建及其体外抑瘤作用的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会学术交流会论文摘要集[C];、田纯见;朱经发;尹锦霞-雏鸡绿脓杆菌病诊断及马立克氏病免疫接种相关的研究[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];
论文目录
摘要6-8
Abstract8-11
第一章文献综述11-17

1.1背景概况11

1.2多胺及托品烷类生物碱的概况11-12

1.2.1多胺的概况11-12

1.2.2托品烷类生物碱的概况12

1.3多胺及托品烷类生物合成途径12-15

1.3.1多胺及托品烷类生物碱生物合成途径网12-14

1.3.2腐氨生物合成途径上的酶和基因14-15

1.3.3ODC途径和ADC途径在植物腐氨合成的贡献15

1.4物理和化学诱导15-17

第二章绪论17-19

2.1研究的目的和作用17-18

2.2研究范围和内容18

2.3技术路线18-19

第三章材料策略19-47

3.1实验材料19

3.2菌株和质粒19

3.3仪器和设备19

3.4试剂盒及试剂19-20

3.5自配试剂20

3.6常规策略介绍20-23

3.6.1RNA的提取20-21

3.6.2DNA产物的琼脂糖凝胶电泳21

3.6.3目的条带的回收21-22

3.6.4目的片段与克隆载体T连接22

3.6.5大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaCl2法)22

3.6.6连接反应物转化大肠杆菌感受态细胞22-23

3.7AbODC基因cDNA的克隆与分析23-31

3.7.1从颠茄总RNA合成第一链cDNA23

3.7.2目的基因的克隆23-28

3.7.3AbODC基因的生物信息学分析28-29

3.7.4颠茄AbODC基因组DNA及启动子序列的克隆29-31

3.8AbODC1基因的原核表达及功能验证31-35

3.8.1AbODC1基因原核表达载体的构建31-34

3.8.2AbODC1重组蛋白的诱导表达34-35

3.8.3AbODC1重组蛋白的诱导表达35

3.9颠茄发根培养体系的建立35-39

3.9.1根癌农杆菌C58C1(pRiA4)的活化35-36

3.9.2根癌农杆菌C58C1(pRiA4)菌株转化颠茄外植体36

3.9.3颠茄发根的PCR鉴定36-37

3.9.4基因表达量的检查37-39

3.9.5颠茄发根中多胺含量的检测39

3.10颠茄植物高校表达工程菌及RNAi沉默工程菌的获得39-47

3.10.1颠茄植物高校表达工程菌的获得39-42

3.10.2颠茄植物RNAi沉默工程菌的获得42-47

第四章结果与分析47-75

4.1AbODC1和AbODC2论文导读：

基因的获得47-49
4.

1.1AbODC1基因的获得47-48

4.

1.2AbODC2基因的获得48-49

4.2AbODC基因的生物信息学分析49-56
4.

2.1AbODC基因的序列分析49-51

4.

2.2AbODC氨基酸序列的多重比对51-53

4.

2.3AbODC分子进化树的构建53

4.

2.4AbODC蛋白的保守结构域分析53-54

4.

2.5AbODC信号肽和转运肽预测54

4.

2.6AbODC蛋白二级结构预测54-55

4.

2.7AbODC蛋白结构预测55-56

4.3AbODC基因DNA和启动子的获得和分析56-62
4.

3.1AbODC1和AbODC2基因组DNA的获得56-59

4.

3.2AbODC1和AbODC2基因启动子分析59-62

4.4AbODC基因的原核表达及功能验证62-65

4.1AbODC1重组蛋白的诱导表达和纯化63-64

4.2AbODC1重组蛋白活性检测64-65

4.5AbODC基因的组织表达谱分析65-66

4.5.1AbODC基因荧光定量引物特异性分析65-66

4.5.2AbODC基因的组织表达谱分析66

4.6颠茄发根对不同诱导子的响应66-71

4.6.1颠茄发根的获得66-67

4.6.2颠茄发根的诱导子处理67-71

4.7AbODC1和AbODC2超量标达及RNAi载体构建71-75

4.7.1工程菌C58C1-P1305-AbODC1和C58C1-P1305-AbODC2的获得71-73
4.7.2工程菌C58C1-PBIN19-AbOBC1和C58C1-PBIN19-AbODC2的获得73-75
第五章结论与展望75-77
参考文献77-83
缩略词表83-85
硕士期间发表论文85
参加课题85-87
致谢87
颠茄鸟氨酸脱羧酶发根诱导处理多胺
参考文献
陆婷;独尾草属两个同域种的繁殖策略[D];新疆农业大学;刊全文数据库何子双;胡元亮;印遇龙;黄瑞林;李飞务;王贵平-甘草次酸对早期断奶仔猪内脏器官发育的影响[J];畜牧兽医学报;、于永生;罗晓彤;金海国;赵越超-多胺代谢相关基因在小鼠子宫内膜细胞中的调节[J];中国农业大学学报;、张翥;董国忠;张文火;韩洪英-断奶仔猪饲粮中添加腐胺的营养生理效应研究[J];中国畜牧杂志;、刘华山,朱大恒,韩锦峰,毕庆文,曾涛;外源植物生长调节物质对烟草根中烟碱含量和烟碱合成酶活性变化的生理效应[J];植物生理学通讯;、张文学;王新霞;李彬;郭玉广-一例樱桃谷雏鸭大肠杆菌病的诊断[J];中国动物检疫;、王秋生-一例乌骨白痢沙门氏菌感染的诊治[J];畜禽业;、穆杨;张彦明;王华;石兴武;高巨星;赵毅-牦牛巴氏杆菌病的诊断报告[J];中国兽医杂志;、徐尚荣-大肠杆菌O157∶H7的生物学特性[J];青海畜牧兽医杂志;、李金钟-与人类和动物感染相关的4个非发酵菌新菌属[J];中国微生态学杂志;、胡利华;闫茂仓;陈少波;单乐州;马爱敏;谢起浪-条石鲷出血病病原的分离与鉴定[J];水产养殖; 前7条 刘贤锡;胡海燕;刘师莲;迟伟玲-鸟氨酸脱羧酶基因表达与良性前列腺增生症相关性研究[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];、王儒鹏;张国威;何云志;黄海-芳维A酸乙酯对小鼠皮肤状瘤形成过程中ODC、PCNA的影响[A];中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];、崔树玉;孙启华;孟蔚;温宪芹;周国清;毕振强-山东省O_(157)大肠杆菌动物宿主带菌情况调查[A];新世纪预防医学面对的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];、王洲;陈蔚文;李茹柳;文彬;孙景波-胃泌素推动大鼠小肠上皮细胞系的分化[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];、王洲;陈蔚文;李茹柳;文彬;孙景波-胃泌素推动大鼠小肠上皮细胞系的分化[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集（第一部分）[C];、张岩;刘贤锡;胡海燕;刘师莲;刘传华;王伟;张冰;孙爱华;姜广水-人ODC基因反义RNA腺病毒载体的构建及其体外抑瘤作用的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会学术交流会论文摘要集[C];、田纯见;朱经发;尹锦霞-雏鸡绿脓杆菌病诊断及马立克氏病免疫接种相关的研究[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C]; 中国重要报纸全文数据库前2条 首都医科大学附属北京友谊医院皮肤科王利锋　杨高云;异维A酸在皮肤科的应用[N];医药经济报;、李延斌;紫苏药效研究新发现[N];中国医药报; 中国博士学位论文全文数据库张岩;腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA抑制前列腺癌的实验研究[D];山东大学;、胡海燕;人鸟氨酸脱羧酶基因的克隆、表达、单抗制备及其初步应用[D];山东大学;、邓文胜;鸟氨酸脱羧酶基因与乳腺癌细胞增殖侵袭关系的实验研究[D];山东大学;、刘琳娜;大黄多糖对肠上皮细胞损伤的修复作用及其机制研究[D];第四军医大学;、徐春晓;肿瘤抑素基因表达与肾癌关系以及鸟氨酸脱羧酶基因表达对肿瘤抑素表达调控作用的研究[D];山东大学;、龚磊;反义RNA技术下调多胺代谢关键酶抑制大肠癌细胞增殖及分子机理研究[D];山东大学;、李玮;前列腺组织特异的ODC和AdoMetDC双反义靶向载体构建及治疗前列腺癌研究[D];山东大学;、迟伟玲;慢病毒介导的鸟氨酸脱羧酶基因沉默抑制结直肠癌细胞生长的体外和体内研究[D];山东大学;、彭利军;影响乙型肝炎病毒感染结局的候选基因多态性研究[D];复旦大学;、王伟;人端粒酶逆转录酶启动子（hTERTpromoter）介导的ODC、SAMDC反义腺病毒的构建及其靶向抗肿瘤研究[D];山东大学; 中国硕士学位论文全文数据库秦白富;颠茄ODC基因克隆和功能分析[D];西南大学;、迟莉;白术黄芪方治疗大鼠溃疡性结肠炎的研究及其对鸟氨酸脱羧酶论文导读：硫氨酸脱羧酶双反义RNA抑制肺癌A-549细胞的实验研究;山东大学;、赵海洲;平邑甜茶多胺合成关键酶基因的克隆、表达及其对胁迫的响应;山东农业大学;上一页123
的影响[D];广州中医药大学;、王巍;鸟氨酸脱羧酶基因表达与卵巢癌关系的研究[D];山东大学;、黄庆;鸟氨酸脱羧酶（ODC）基因表达与老年人肺癌临床相关性的研究[D];山东大学;、李松岩;ODC在口腔白斑中的表达及作用[D];大连医科大学;、孙东峰;ODC和AdoMetDC双义腺病毒对肺癌增殖和侵袭抑制作用的研究[D];山东大学;、阎云飞;鸟氨酸脱羧酶基因作为胃癌诊治靶标可行性的研究[D];山东大学;、李林;腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA抑制肺癌的实验研究[D];山东大学;、孙启峰;腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶双反义RNA抑制肺癌A-549细胞的实验研究[D];山东大学;、赵海洲;平邑甜茶多胺合成关键酶基因的克隆、表达及其对胁迫的响应[D];山东农业大学;