海生红藻多管藻中四种R-藻红蛋白分离、纯化及多肽组成浅析

论文片段—蛋白粗提液,有电荷差异的四种藻红蛋白(phycoerythrin,PE)和一种藻蓝蛋白(phycocyanin,PC),其中藻红蛋白为主要研究对象。然后经过SephadexG-150和SephacrylS-300凝胶过滤层析对这四种藻红蛋白纯化,分别为PE_(169)-1、PE_(267)-1、PE_(356)-2和PE_(523)-2。这四者具有非常的吸收光谱和荧光光谱,分别在498nm、540nm和565红藻论文,多管藻论文,藻胆蛋白论文,R-藻红蛋白论文,层析论文,凝胶电泳论文,二维电泳论文,
摘要：本研究用50 mmol/L的磷酸缓冲液(pH=7.0)浸泡一种海生红藻多管藻(Polysiphonia urceolata Grev),经过超声波破碎和硫酸铵沉淀,藻胆蛋白粗提液。经过DEAE-52离子交换层析分离藻胆蛋白粗提液,有电荷差异的四种藻红蛋白(phycoerythrin, PE)和一种藻蓝蛋白(phycocyanin, PC),其中藻红蛋白为主要研究对象论文格式要求。然后经过Sephadex G-150和Sephacryl S-300凝胶过滤层析对这四种藻红蛋白纯化,分别为PE_(169)-1、PE_(267)-1、PE_(356)-2和PE_(523)-2。这四者具有非常的吸收光谱和荧光光谱,分别在498 nm、540 nm和565 nm左右处都有特征吸收峰,在576 nm处有一个荧光发射峰;四种藻红蛋白中除PE_(169)-1外,其它三种藻红蛋白PE_(267)-1、PE_(356)-2和PE_(523)-2在非变性的PAGE和非变性的IEF中均表现为单一条带,且等电点分别为4.5、4.4和4.4论文大纲怎么写。PE_(169)-1含量较少,非变性的PAGE和IEF、变性的IEF和SDS-PAGE分析其可能为藻红蛋白六聚体解离的小分子PE本科毕业论文范文。PE_(267)-1、PE_(356)-2和PE_(523)-2的SDS-PAGE、变性等电聚焦和二维电泳结果:三者均由三种相同的含发色团的有色亚基组成,其分子质量分别为18.4 kDa (α)、20.7 kDa (β)和34.5 kDa (γ),其比例为3α:3β:1γ,且PE_(356)-2和PE_(523)-2还含有45.7 kDa的无发色团多肽(Lnk45.7),PE_(523)-2含有62.1 kDa的无发色团多肽(Lnk~(62.1)),其比例分别为6α:6β:2γ:1Lnk45.7 , 6α:6β:2γ:0.5Lnk~(62.1) ,可能的存在形式为(αβ)3-γ-(αβ)3-γ、γ-(αβ)3-γ-(αβ)3- Lnk45.7和γ- (αβ)3-γ-(αβ)3- Lnk~(62.1)。和γ亚基一样,Lnk45.7和Lnk~(62.1)可能作为连接多肽在“杆”结构域连接六聚体R-PE。二维电泳分析,α亚基有等电点不同的三种形式,其等电点分别为5.95、5.80和5.65;β亚基五种不同形式,等电点分别为5.56、5.46、5.33、5.25和5.11。这些结果为R-PE六聚体及其构建大型红藻藻胆体“杆”结构域研究了有价值的实验毕业论文致谢怎么写。本实验建立的层析、PGAE、IFE和二维电泳的方法可应用于其它大型红藻的藻胆蛋白组成研究毕业论文总结。关键词：红藻论文多管藻论文藻胆蛋白论文R-藻红蛋白论文层析论文凝胶电泳论文二维电泳论文
摘要4-5
Abstract5-9
1 引言9-18

1.1 藻胆蛋白10-16

1.1 藻红蛋白12-14

1.2 藻蓝蛋白14-15

1.3 别藻蓝蛋白15-16

1.2 藻胆体16-17

1.3 藻胆蛋白的应用17-18

1.4 研究18

2 与实验方法18-27

2.1 18

2.2 实验方法18-27

2.1 藻胆蛋白的提取18-19

2.2 藻红蛋白的分离纯化19-21

2.3 藻红蛋白的多肽分析21-26

2.4 藻红蛋白的光谱测定26-27

3 实验结果27-64

3.1 藻胆蛋白的提取27-28

3.2 藻红蛋白的分离纯化28-41

3.

2.1 DEAE-52 离子交换层析28-31

3.

2.2 Sephadex G-150 凝胶过滤层析31-36

3.

2.3 Superdex-300 凝胶过滤柱层析36-38

3.

2.4 藻红蛋白的荧光光谱38-41

3.3 藻红蛋白的电泳分析41-61

3.1 藻红蛋白的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳41-42

3.2 藻红蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳42-47

3.3 藻红蛋白的非变性-等电聚焦47-50

3.4 藻红蛋白4.0~6.5 pH 变性-等电聚焦50-52

3.5 藻红蛋白的二维电泳52-59

3.6 藻红蛋白0~10.0 pH 变性-等电聚焦59-61

3.4 藻红蛋白主要亚基条带的吸收光谱61-64

4 讨论与总结64-68

4.1 多管藻藻红蛋白的制备64-65

4.2 四种藻红蛋白的电泳分析结果总结65-68

参考文献68-74
致谢74-75
附录:发表论文情况75-76