探索耐药碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌耐药机制及分子流行病学

论文导读：法进行药敏试验，PCR扩增及测序浅析碳青霉烯酶基因，并采取脉冲场凝胶电泳(Pulse-fieldElectrophoresis,PFGE)及多位点序列分型(MultilocusSequenceTyping,MLST)进行分子流行病学探讨，同时浅析血流感染患者的临床资料。结果：血流感染患者多个不同部位标本分离鲍曼不动杆菌150株，其中血标本83株、呼吸道标本（痰或支气管吸取
摘要：目的：通过对北京市海淀医院及北京协和医院血流感染患者的血液中分离出的碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制和分子流行病学探讨，阐明耐药机制，了解流行特点，以而为临床科学防治提供依据。策略：收集北京市海淀医院及北京协和医院2009年1月—2010年10月总共83例血流感染患者不同部位（包括血液、痰、静脉导管、引流液、分泌物等不同部位）分离的非重复鲍曼不动杆菌菌株150株，所有的菌株按照统一的操作规程采取纸片扩散法进行药敏试验，PCR扩增及测序浅析碳青霉烯酶基因，并采取脉冲场凝胶电泳(Pulse-field Electrophoresis,PFGE)及多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing, MLST)进行分子流行病学探讨，同时浅析血流感染患者的临床资料。结果：血流感染患者多个不同部位标本分离鲍曼不动杆菌150株，其中血标本83株、呼吸道标本（痰或支气管吸取物）54株、静脉导管尖4株、其它标本（分泌物、引流液、尿和胆汁等）9株。137株为碳青霉烯耐药菌株，13株为碳青霉烯敏感菌株。所有菌株除对米诺环素耐药率（36.7%）较低外，对其他16种抗菌药物都保持较高的耐药率（≥73.3%）。碳青霉烯酶基因检测：所有菌株均携带有blaOXA-51-pke基因，133株携带blaOXA-23-pke基因（占88.7%），未检测出其它碳青霉烯酶基因。流行病学分型：150株Aba菌株MLST分型共分为10个ST型（有7株未分出）：ST208、ST218、ST368-375，其中ST218和ST370为海淀医院流行株，ST208、ST368和ST370为协和医院主要流行株；ST368-375为本探讨中新提交的ST型；PFGE分型共分为A-O等15个型，海淀医院流行型别为A和C型，而协和医院主要的流行型别为A和B型。患者临床资料浅析发现血流感染死亡率达45.2%，平均年龄达60.8岁，主要分布在ICU；62.9%患者伴发肺部感染，29.0%伴有肺部感染以外一个或多个部位；79.0%患者感染前接受至少一种或多种侵袭性操作；所有患者在感染前都接受过至少一种抗生素治疗，其中69.4%利用抗菌药物≥3种。结论：产碳青霉烯酶OXA-23是本探讨中Aba碳青霉烯类耐药的主要耐药机制，也有着其他耐药机制，有待于进一步探讨；同一型别克隆在不同医院间、不同科室间或同一科室不同患者间有着克隆传播；同一患者不同部位间（如血和痰、血和胆汁、血和肾盂引流液等）分离的Aba经MLST或PFGE分型看，绝大多数来自于同一克隆株，说明原发病引起血流感染居多，主要是肺部感染。关键词：鲍曼不动杆菌论文耐药机制论文流行病学论文
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ABSTRACT5-9
第1章 引言9-12
第2章 材料和策略12-20

2.1 材料12-15

2.

1.1 菌株来源12

2.

1.2 主要仪器12-13

2.

1.3 主要试剂13

2.

1.4 主要耗材13-14

2.

1.5 自配试剂14-15

2.2 策略15-20

2.1 细菌传代15

2.2 药敏试验15

2.3 细菌 DNA 提取15-16

2.4 PCR 扩增碳青霉烯酶基因16-17

2.5 多位点序列分型（MLST）17-18

2.6 脉冲场凝胶电泳（PFGE）18-20

第3章 结果20-28

3.1 血流感染 Aba 患者临床资料20

3.2 Aba 药敏试验20-21

3.3 PCR 扩增碳青霉烯酶基因21

3.4 MLST 分型21-22

3.5 PFGE 分型22-28

第4章 讨论28-33
第5章 结论33-34
致谢34-35
参考文献35-39
附图39-45
攻读学位期间的探讨成果45-46
综述46-52
参考文献51-52