浅议结缔组织脾切除对肝纤维化大鼠肝脏CTGF表达及血清CTGF水平影响

论文导读：
摘要：目的本课题探讨脾切除对肝纤维化大鼠肝脏CTGF的表达和血清CTGF水平的影响,以而探讨脾切除在肝纤维化治疗中的可能作用。策略雄性清洁级SD大鼠80只,随机分为正常对照组8只和模型组72只。对模型组大鼠皮射CCL4,建立72例肝纤维化大鼠模型。模型组大鼠随机分成三大组,分别于建模开始,建模第5周,及建模第10周切除大鼠脾脏,并设立同期假手术组作为对照组。第一、二组及其对照组于建模后第10周,第三组及其对照组于建模后14周分别取大鼠肝脏和血液标本。用HE染色检测肝纤维化程度,免疫组化策略测定肝脏CTGF的表达,运用HPIAS-1000电脑彩像系统对阳性目标进行定量浅析,运用双抗体夹心ELISA策略测定血清CTGF水平。结果(1)CTGF1阳性物质主要位于肝间质细胞的胞浆内,呈棕。CTGF阳性染色部位主要分布在汇管区、纤维间隔、炎症区,少数在肝窦内。(2)正常组大鼠和不同纤维化时期大鼠肝脏CTGF的吸光度值分别为：0.016±0.007,0.108±0.011,0.159±0.008；正常组大鼠和不同纤维化时期大鼠血清CTGF(ng/ml)含量分别为：3.211±0.225,11.91±0.595,22.008±2.308。统计结果均表明,随着肝纤维化的进展,大鼠肝脏及血清CTGF含量逐渐增加(P0.01)(3)不同时期切脾组大鼠血清CTGF的水平分别为(ng/m1)：7.064±0.326,12.245±0.448,17.001±0.252；而同期假手术组其血清CTGF的水平分别为(ng/ml):20.925±1.023,22.356±1.285,23.129±1.221。实验结果表明,各切脾组血清CTGF含量显著低于其同期假手术组(p0.05)。(4)根据HE染色结果,建模开始时切脾再行肝纤维化诱导,肝纤维化进程缓慢；建模后第5周切脾,肝脏病理状态比对照组显著缓解；建模后第10周切脾,肝脏炎性转变和纤维化程度有一定减轻。(5)不同时期切脾大鼠肝脏CTGF的阳性细胞吸光度值(A值)分别为：0.049±0.011,0.072±0.013,0.098±0.018；而同期假手术组CTGF阳性细胞A值分别为：0.157±0.035,0.165±0.012,0.182±0.029。结果表明,各切脾组肝脏CTGF阳性细胞A值显著低于其对照组(p0.05)。(6)模型组中各手术组大鼠肝脏及血清CTGF的含量采取单因素方差浅析q检验进行均数的两两比较表明,切脾时间越早,肝脏及血清CTGF的含量越低,切脾时间对CTGF的降低有影响(p0.05)。结论(1)随着肝纤维化程度的进展,大鼠肝脏及血清CTGF的阳性表达逐渐增强。(2)脾脏切除能降低肝纤维化大鼠肝脏CTGF的表达以及血清中CTGF的水平,有助于缓解肝纤维化程度。(3)肝纤维化进程中早期切脾对延缓肝纤维化进展有一定的作用。关键词：结缔组织生长因子论文肝纤维化论文脾切除论文免疫组织化学论文ELISA论文
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Abstract6-10
中英文缩略词对照10-11
第一章 前言11-13
第二章 材料与策略13-18

2.1 实验动物13

2.2 主要试剂13

2.3 主要实验仪器13

2.4 实验策略13-17

2.4.1 实验动物分组13-14

2.4.2 造模策略14

2.4.3 大鼠脾脏切除14

2.4.4 标本采集及处理14-15

2.4.5 肝脏标本HE染色15

2.4.6 大鼠肝脏标本的免疫组化染色15-16

2.4.7 大鼠血清CTGF浓度的测定16-17

2.5 统计浅析策略17-18

第三章 结果18-26

3.1 大鼠肝纤维化造模结果18-20

3.2 各手术切脾组及同期对照组肝脏HE染色结果20-21

3.3 CTGF的表达和分布21-22

3.4 CTGF在肝脏表达的定量浅析22-23

3.5 CTGF在血清表达的定量浅析23-26

第四章 讨论26-30

4.1 CTGF与肝纤维化26-28

4.2 脾切除与肝纤维化28-30

第五章 结论30-31
参考文献31-34
综述34-51
参考文献44-51
致谢51-52
攻读学位期间主要的探讨成果52