试析昆明山海棠提取物对人血管内皮及血管平滑肌细胞增殖影响-生

论文导读：人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人血管平滑肌细胞(VC)的影响,以探讨其在防治RS中的可能机制。策略：无菌培养人脐静脉内皮细胞及血管平滑肌细胞,选择生长良好的第4-10代人脐静脉内皮细胞及血管平滑肌细胞用于实验。台盼蓝(trypanblue)排斥实验检测TH-1对HUVEC成活率的影响。改良MTT法观察TH-1对正常HUVEC及VC增殖的影响。流式
摘要：目的：经皮腔内冠状动脉介入治疗(PCI)已经成为冠心病治疗的一个重要手段,但术后6个月内30%-45%的再狭窄(RS)发生率严重影响了PCI的临床疗效。探讨发现PCI术导致的血管内膜损伤可推动平滑肌细胞增殖、迁移,最终引起血管新生内膜形成及重塑而发生RS。有效抑制VC增殖,并尽快恢复内皮细胞(EC)活性及加速EC的修复,是防治RS的关键。昆明山海棠(THH)系卫茅科雷公藤属植物的一种,探讨发现THH除了具有强力的抗免疫活性外,还具有抗炎、抗肿瘤、抗生育等药理作用。本探讨运用THH中提取的主要活性成分TH-1来观察其对离体培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人血管平滑肌细胞(VC)的影响,以探讨其在防治RS中的可能机制。策略：无菌培养人脐静脉内皮细胞及血管平滑肌细胞,选择生长良好的第4-10代人脐静脉内皮细胞及血管平滑肌细胞用于实验。台盼蓝(trypan blue)排斥实验检测TH-1对HUVEC成活率的影响。改良MTT法观察TH-1对正常HUVEC及VC增殖的影响。流式细胞术检测TH-1对HUVEC及VC周期分布情况。TUNEL/PI双染法检测TH-1对VC凋亡变化情况。结果：5-200μg/mL的TH-1与VC共同孵育24,48,72,96小时后,MTT比色浅析结果显示VC吸光度降低,且呈一定程度的浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测示用药后低剂量TH-1组(25μg/m1)使VC有丝分裂被阻断于Go/G1期,高剂量组(100μg/m1)用药后VC有丝分裂被阻断于G0/G1期及G2/M期,并通过TUNEL/PI双染法发现TH-1有诱导VC凋亡的作用。1-200μg/ml的TH-1与HUVEC共同孵育24,48,72,96小时后,发现TH-1能使HUVEC存活率降低；MTT比色浅析结果显示VC吸光度降低,且呈一定程度的浓度和时间依赖性。流式细胞仪检测示用药后TH-1使HUVEC的G0/G1期细胞百分数显著增加。结论：TH-1主要通过诱导凋亡作用抑制VC增殖,对于抑制支架植入后新生内膜形成有潜在的临床运用价值,但其对血管内皮细胞亦有非选择性的抑制作用,其机理可能与其抑制HUVEC细胞周期的G1/G0期向S期过渡,使之停滞于细胞周期的G1/G0期有关。关键词：昆明山海棠论文人血管内皮细胞论文人血管平滑肌细胞论文增殖论文
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中文摘要6-8
英文摘要8-10
前言10-12
材料和策略12-19
结果19-29
讨论29-34
结论34-35
参考文献35-38
文献综述38-46
参考文献44-46
攻读学位期间发表文章情况46-47
致谢47